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对人抗体进行训练以便抵抗HIV感染(艾滋病的防控常识)

佚名 2024-05-29 11:21:30

对人抗体进行训练以便抵抗HIV感染

2016年10月14日讯 在HIV感染期间,这种病毒发生突变如此之快以至于免疫系统不能抵抗,但是一些人即便在感染两年后仍然产生能够识别这种病毒的抗体。

为了开发一种HIV疫苗,在四项发表在Cell期刊和Immunity期刊上的研究中,研究人员描述了一种多步骤方法在转基因小鼠体内“训练”免疫系统产生这些抗体。

这些被称作广泛中和抗体(bnAbs)的抗体能够识别这种病毒的很多不同毒株。美国洛克菲勒大学分子免疫学家Michel Nussenzweig说,“它们并不仅仅捕获它们遇到的这种病毒的第一种或第二种变异体。它们获得捕获它们之前看到的所有发生突变的HIV病毒变异体的能力。”

当自然产生时,这些抗体并不足以强有力地治愈这种全身性感染,但是经一种疫苗诱导后,它们能够足够强地阻止这种感染。作为一种概念测试,通过利用经过基因改造模拟人免疫系统的小鼠开展研究,Nussenzweig团队开发出一种方法来训练免疫系统和产生一类被称作PGT121的与多种HIV毒株发生反应的抗体。

人免疫系统含有许多种不同的抗体前体(antibody precursor),但是仅有一些抗体前体能够产生PGT121抗体,因此研究人员首先不得不在基因上分析这些抗体以便确定它们的幼稚状态(naive state)可能是什么样子。随后,在美国斯克里普斯研究所免疫学家William Schief领导下,他们从HIV作为开始研究的起点进行逆向研究,构建出一系列病毒蛋白结构,从而能够教导这些抗体识别多种天然的HIV毒株。

Schief说,“这些抗体前体,或者我们作为它们的前体进行评估的分子,本身似乎没有可检测到的针对这种病毒的亲和力。我们需要将HIV转化为启动这一过程的某种稳定的东西。”对这些病毒蛋白结构的构建在一篇发表在Immunity期刊上的研究中得到突出强调。在这个设计过程结束时,研究人员拥有一系列修饰的免疫原作为指导这些抗体产生的垫脚石。

Nussenzweig团队进一步利用转基因小鼠测试了这种迭代训练过程。这些经过基因修饰的小鼠并不产生在小鼠免疫系统正常条件下发现的抗体谱,而是仅仅制造能够产生PGT121抗体的人抗体前体。研究人员利用Schief开发出的能够结合到PGT121抗体前体上的首个合成免疫原开始研究,随后对小鼠血清进行测试以便观察是否有任何抗体也对这一系列免疫原中的下一个免疫原作出反应,从而逐步地接近于天然的HIV。

这一过程确实有效:研究人员成功地在小鼠体内获得成熟的类似于在HIV感染者中发现的广泛中和抗体。然而,Schief和Nussenzweig强调他们的研究提供一种概念框架来开发HIV疫苗,但不是疫苗本身。Nussenzweig说,“我们是在一种非常人为的模式小鼠体内开展研究的。在正常的小鼠---或者正常人---体内,免疫系统具有巨大的抗体库,我们正在寻找的抗体前体仅是其中的一小部分。如果我们把相同的初始免疫原导入一种野生型的动物体内,那么有足够的免疫原发现合适的抗体前体就会让这整件事情开始是非常不可能的。”

但是,Schief说,“你不得不从某个地方开始。这是一个很大的飞跃:我们已证实通过疫苗接种引导来自人生殖细胞的抗体成熟从而产生广泛中和抗体是可能的。”

如今,随着建立的HIV疫苗开发策略在手,下一步就是开发对实际上存在于人体内的抗体前体具有高亲和力的免疫原。这将允许疫苗在一个多样化的自然环境中寻找和训练人免疫系统的合适部分。

用于快速测试HIV疫苗的模式小鼠

在一项相关的发表在Cell期刊上的研究中,来自美国波士顿儿童医院和国家过敏症与传染病研究所(NIAID)的研究人员发现如何快速地产生人源化模式小鼠来测试新的HIV疫苗接种策略。在他们的模式小鼠体内,B细胞组装一系列高度多样化的HIV抗体前体,这些抗体前体经教导后产生能够产生中和一些HIV毒株的人源化抗体。

论文共同通信作者、波士顿儿童医院细胞与分子医学项目主任Fred Alt说,“我们的方法并不是通过一代又一代的小鼠培育来获得模式小鼠,这就允许我们快速地剔除和替换基因组元件从而导致B细胞发生变化。因此,我们能够利用经首次成功的抗原免疫后筛选的中间抗体基因快速地对这种模式小鼠进行重编程,并且让它们接触新的抗原。我们希望它将是非常有用的。”

论文共同通信作者、NIAID疫苗研究中心主任John Mascola补充道,“我们需要进一步理解如何引起最佳的抗体亲和成熟以便进化出有效中和病毒的抗体反应。但是这些问题能够部分上在我们的人源化模式小鼠中得到解决,从而有助为I期人体研究选择疫苗抗原和免疫策略。”

艾滋病的防控常识

1. 艾滋病的预防常识有哪些
什么是艾滋病(AIDS)? 答: 艾滋病是AIDS的音译,AIDS是人类获得性免疫缺陷综合征的英文缩写。

艾滋病的医学全称为“获得性免疫缺陷综合征”,英文全称为Acquired Immunodeficiency Syndrome。 艾滋病是一种世界性、致死性传染性疾病。

这个命名表达了艾滋病的完整概念,从中我们可以了解到艾滋病的三个明确定义:(1)获得性:表示在病因方面是后天获得而不是先天具有的,艾滋病是由一种逆转录病毒,亦即艾滋病病毒引起的传染病。主要通过性接触、吸毒、围产期等途径传染。

(2)免疫缺陷:表示在发病机理方面,主要是造成人体免疫系统的损伤而导致免疫系统的防护功能减低、丧失。(3)综合征:表示在临床症状方面,由于免疫缺陷导致的各个系统的机会性感染、肿瘤而出现的复杂症状群。

也就是我们常说的艾滋病。 艾滋病是哪年发现的? 艾滋病是1981年发现,1982年正式命名为“获得性免疫缺陷综合征”。

引起“人类获得性免疫缺陷综合征”的病毒在1983年被发现。现在广泛使用的名称“人类免疫缺陷病毒”是1996年国际微生物学会及病毒分类学会统一命名的专用名词。

什么是HIV? HIV是艾滋病病毒(human immunodeficiency virus)的缩写。是一种能生存于人的血液中并攻击人体免疫系统的病毒。

它把人体免疫系统中最重要的T4淋巴细胞作为攻击目标,大量吞噬、破坏T4淋巴细胞,从而使整个人体免疫系统遭到破坏,最终人体丧失对各种疾病的抵抗能力而导致死亡。科学家把这种病毒叫做"人类免疫缺陷病毒"。

下面是HIV的照片(左)和模型(右)。 妇女如何作好自我保护? ①主动认识有关艾滋病的知识,了解预防方法。

②洁身自好,与唯一的固定性伴有性关系。 ③劝说自己的配偶或性伴了解认识艾滋病,以保护他们不受艾滋病病毒的感染,保护他们就是保护自己。

④清楚了解性伴的生活背景和习惯,如有怀疑,应拒绝与他发生性接触或坚持使用避孕套。 ⑤决不与人共用注射器和针头。

HIV传播必须同时具备的三个条件是什么? ① 有大量的病毒从感染者体内排出。 ② 排出的病毒要经过一定方式传递给他人。

③ 有足量的病毒进入体内。 艾滋病的传播途径有哪些? 实验证明,HIV感染者的血液、 *** 、 *** 分泌物、乳汁等都带有HIV。

因此可知,HIV是经性接触、血液、母婴(围产期)、母乳喂养途径传播的。 HIV的主要传播方式是什么? 在艾滋病流行的早期,首先发现大多数的HIV感染是同性恋者。

但是,随着艾滋病流行的进展和流行病学调查的不断深入,发现由于异性人群规模大,HIV在异性人群中传播已经成为当今的主要传播方式,占全球总感染人数的70%。 妇女感染HIV与男性有什么差别? 女性同性恋常与艾滋病无关,因为女同性恋的 *** 多为1:1,而且相互间很少体液交换。

女性较男性更易感染HIV,一般认为,经性接触途径,男性传给女性的机率是女性传给男性机率的2—4倍。 社交场合的接触会传播艾滋病吗? HIV偶尔也存在于其他体液中,如眼泪、唾液和汗液中,但是一般情况下存在的数量很少,不足以导致HIV的传播。

所以,在社交场合偶尔接触,诸如握手、公用设备或卫生间、一起进餐、打喷嚏、拥抱和礼节性接吻,一般不会传染HIV。 蚊子会传播艾滋病吗? 据研究表明,艾滋病病毒在蚊子体内既不发育也不繁殖,所以不可能通过生物性的方式进行传播。

而机械的传播方式,在蚊子身上也不可行。这是因为,蚊子在吸血前,先由唾液管吐出唾液(作为其润滑剂以便吸血),然后由食管吸入血液,而血液的吸入是单向的,吸入后不会再吐出。

另外,蚊子嘴上残留的血液因其仅有0.00004毫升,要反复叮咬2800次后,才能引起HIV感染。而且,即使蚊子吸入了带有艾滋病病毒的血液,艾滋病病毒在2~3天内即可被蚊子消化、破坏而完全消失。

根据蚊子的生理特点,蚊子一旦吸饱血后,要待完全消化后才会再叮人吸血。目前,世界范围内尚未发现蚊子或是昆虫叮咬而感染艾滋病的报道。

因此可不必担心蚊子传播乙型肝炎和艾滋病。 唾液能否传播艾滋病? 唾液中的确可查到艾滋病病毒,但其中的病毒量是很少的。

艾滋病病毒要达到一定量都能引起传播。有人推算过,如果要使唾液中的病毒达到致感染量,恐怕要一次吞下20毫升以上感染者的唾液。

另外美国科学家发现,人的唾液中有一种“分泌性白细胞抑制蛋白酶”的蛋白质,这种蛋白在试管中可以有效抑制艾滋病病毒感染人体免疫细胞,所以一般性接吻、共同进餐、咳嗽或打喷嚏都不可能感染艾滋病的。目前的报道中也无经唾液感染的病例报告。

但是热烈地深吻并伴有感染者口腔牙龈出血或发生溃疡; *** 中,感染者的 *** 排放到健康人的口腔中时,就有可能发生艾滋病毒通过口腔粘膜而进入血液的传播。 哪些是艾滋病的高危因素? 同性恋;多个 *** ;无保护的插入性 *** ;同时患有性传播疾病;静脉注射吸毒;输血传播。

艾滋病的流行趋势? 自1981年美国首次发现艾滋病以来,艾滋病以异常迅猛的速度蔓延到世界各地,几乎没有一个国家可以幸免。截止到1999年底,全球累计艾滋病病毒感染和艾滋病病人4990万人,其中成人4510万,成人中有妇女21。
2. 爱滋病怎样预防
对个人预防来说,除掌握有关艾滋病知识外,尚须做到: (1)洁身自爱,不去非法采血站卖血,不涉足色情场所,不要轻率地进出某些娱乐场所;任何场合都应保持强烈的预防艾滋病意识;不要存在任何侥幸心理;不要因好奇而尝试吸毒。

(2)生病时要到正规的诊所、医院求治,注意输血安全,不到医疗器械消毒不可靠的医疗单位特别是个体诊所打针、拔牙、针炙、手术。不用未消毒的器具穿耳孔、文身、美容。

(3)不与他人共享剃须刀、牙刷等,尽量避免接触他人体液、血液,对被他人污染过的物品要及时消毒。 (4)注意与艾滋病病人的接触:给艾滋病病人采血及注射时,注射器应采用一次性用品,病人的血液、排泄物、污染的物品应进行彻底焚烧。

病人的器皿及医用器械要专人专用,如病人的刮脸刀、牙刷、毛巾、茶杯等应专人专用,排尿、排便后要用肥皂洗手,可达到消毒的目的。 应禁止HIV抗体阳性者献血及提供其它体液。

应告诉患艾滋病的妇女,不要口对口给婴儿喂食;月经期应特别处理好经血,不得使之污染他物;性生活时要采用避孕套,以防感染他人。同时,尽量说服病人不要怀孕,因为怀孕期可以将艾滋病病毒传染给后代。

病人的 *** 、配偶要定期进行艾滋病病毒抗体检查;对抗体阳性者家庭的其它成员,在有条件的地区也要进行艾滋病病毒检查。 总之,艾滋病虽是不治之症,但可以预防。

最要紧的是要遵守zf法令,遵守性道德,特别要注意非法黑血站——再贫穷也不能去卖血,再紧急也不能输用可能污染HIV的血,以免感染艾滋病病毒。若有艾滋病感染可疑时,你可以到各地医学科研机构,大医院,省、市级防疫机构接受检查;一次抽血艾滋病病毒抗体阴性,不能完全排除没有传染上艾滋病,应定期检查。
3. 艾滋病预防知识问答
1艾滋病是一种病死率极高的严重传染病,目前还没有治愈的药物和方法,但可以预防。

2、艾滋病主要通过性接触、血液和母婴三种途径传播。 3、与艾滋病病人及艾滋病病毒感染者的日常生活和工作接触不会感染艾滋病。

4、洁身自爱、遵守性道德是预防经性途径传染艾滋病的根本措施。 5、正确使用避孕套不仅能避孕,还能减少感染艾滋病、性病的危险。

6、及早治疗并治愈性病可减少感染艾滋病的危险。 7、共用注射器吸毒是传播艾滋病的重要途径,因此要拒绝毒品,珍爱生命。

8、避免不必要的输血和注射,使用经艾滋病病毒抗体检测的血液和血液制品。 9、关心、帮助和不歧视艾滋病病人及艾滋病病毒感染者是预防与控制艾滋病的重要方面。

10、艾滋病威胁着每一个人和每一个家庭,预防艾滋病是全社会的责任。
4. 安全教育艾滋病预防知识
安全教育艾滋病预防知识被英盛观察分为四点:

(1)洁身自爱,不去非法采血站卖血,不涉足色情场所,不要轻率地进出某些娱乐场所;任何场合都应保持强烈的预防艾滋病意识;不要存在任何侥幸心理;不要因好奇而尝试吸毒。

(2)生病时要到正规的诊所、医院求治,注意输血安全,不到医疗器械消毒不可靠的医疗单位特别是个体诊所打针、拔牙、针炙、手术。不用未消毒的器具穿耳孔、文身、美容。

(3)不与他人共享剃须刀、牙刷等,尽量避免接触他人体液、血液,对被他人污染过的物品要及时消毒。

(4)注意与艾滋病病人的接触:给艾滋病病人采血及注射时,注射器应采用一次性用品,病人的血液、排泄物、污染的物品应进行彻底焚烧。病人的器皿及医用器械要专人专用,如病人的刮脸刀、牙刷、毛巾、茶杯等应专人专用,排尿、排便后要用肥皂洗手,可达到消毒的目的。
5. 预防艾滋病基本知识有哪些
艾滋病(AIDS)全称为获得性免疫缺陷综合症。它是由艾滋病病毒(HIV)引起的一种目前尚无预防疫苗、又无有效治愈办法且病死率极高的传染病。艾滋病病毒(HIV)通过严重破坏人体免疫功能,造成人们的抵抗力极度低下,最终致全身衰竭而死。

艾滋病在某些地区已进入飞速增长期,如印度、泰国,如不加以防范,可能在不久的将来和乙肝一样普遍,我国很多省市已经发现了艾滋病病人和艾滋病带毒者,这应引起我们的高度重视。

艾滋病(AIDS)主要通过血液、 *** 、 *** 分泌物、乳汁等体液传播。已证实的传染途径有三种:

1、性传播:通过异性或同性性行为传播。

2、血液传播:通过共用不消毒的注射器和针头注射毒品、输入含有艾滋病病毒的血液或血液制品、使用未经消毒或消毒不严的各种医疗器械(如:针头、针灸针、牙科器械、美容器械等)、共用剃须(刮面)刀及牙刷等传播。

3、母婴传播:通过胎盘、产道和哺乳传播。

艾滋病(AIDS)不会通过空气、饮食(水)传播,不会通过公共场所的一般性日常接触(如:握手、公共场所的座椅、马桶、浴缸等)传播,不会通过纸币、硬币、票证及蚊蝇叮咬而传播,游泳池也不会传播。

虽然艾滋病是一种极其危险的传染病,但对于个人来讲是完全可以预防的,其主要预防措施为:

1、遵守法律和道德、洁身自爱、反对婚前性行为、反对性乱。

2、不搞卖淫、嫖娼等违法活动。

3、不以任何方式吸毒,远离毒品。

4、不使用未经检验的血液制品,减少不必要的输血。

5、不去消毒不严格的医疗机构打针、拔牙、针灸、美容或手术。

6、不共用牙刷、剃须(刮面)刀。

7、避免在日常工作、生活中沾上伤者的血液。

8、根据国外经验正确使用避孕套有助于避免感染艾滋病。

9、患有性病后应及时、积极进行治疗,否则已存病灶会增加艾滋病感染的危险。

对于老年人来说,如何才能预防艾滋病?艾滋病的传染源是什么?

艾滋病是一种危害性极大的传染性疾病,艾滋病的传播途径主要是经过性传播,母婴传播和血液传播的。

防止性传播洁身自爱,远离不洁性行为。

树立正确的性爱观,任何与HIV感染者发生性行为的过程都有可能传播HIV,因此,性伴侣越多,感染HIV的几率越大。有一些老年人因为生活条件好了,就开始追求一些好的性生活,也就容易出现一些性病,例如艾滋病。

我们容易忽视了老年人艾滋病的预防问题,其实老年人是需要我们多关心的。同时应该重视老年人的艾滋病预防。想要预防老年人艾滋病,就应该多了解一些老年人的生活,所以我们应该多注意关心老人,带着老人经常出去游玩,让老人知道不是孤独的个体,这样老年人也就不会误入歧途,同时应该告知老人艾滋病的危害性,让老年人远离艾滋病的困扰。所以我们还应该掌握一些关于艾滋病的预防工作,传染源的管理,高危人群应该定期的体检HIV抗体,医疗卫生部门发现感染的患者应该及时上报,然后对感染者进行HIV相关的知识普及,这样就可以避免传染把疾病传染给他人。

老人艾滋病的护理



老人患艾滋病护理主要是让患者保持清洁卫生。老人得了艾滋病以后一定要注意个人卫生,每天晚上用温水清洗,定时定量服用医生给开出的药品。一旦有异常情况及时到医院就诊,让专业医生进行治疗,否则病毒会在体内复制繁殖,还可能会侵入到许多脏器官内出现生命危险。老人本身体质就比较虚弱,很容易受到一些病菌和病毒侵入,而且一旦患病以后,很难得到完全治愈,一定要多给予鼓励和关心。

针对老年人由于代谢的改变,部分患者在服药以后,副作用可能会比成人明显。因此在进行抗病毒治疗以后,需要比成人更密切的观察。

什么是HIV

HIV
艾滋病,既获得性免疫缺陷综合症( AIDS ),是由人类免疫缺陷病毒( HIV )引起的一种免疫缺陷性疾病。到 2002 年 6 月底全球已有 6000 万人感染了 HIV ,其中 2000 万人已被艾滋病夺去生命,艾滋病正已每天 1.4 万人受感染的速度扩大流行,目前该病尚无法治愈,也无有效疫苗。截止到 2003 底我国 HIV 感染者已近 84 万,进入了快速增长期,据有关专家估计,如不采取积极有效的控制措施,到 2010 年我国 HIV 感染者将达 1000 万,形势十分严峻。 HIV 感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分,只有发现传染源才能更有效地控制艾滋病传播。通过检测 HIV 的特异性抗体、抗原、核酸或病毒分离培养可确立 HIV 感染, WHO 和我国卫生部推荐使用的 HIV 感染诊断方法是血清学抗体检测。。

一、 HIV 检测的特殊性

HIV 检测不同于其他病原微生物检测,要求十分严格,任何错误的诊断,包括假阳性或假阴性,都会对被检者产生十分重要的影响。因此, HIV 检测必须严格按照国家制定的《艾滋病检测工作管理办法》和《艾滋病检测技术规范》(以下简称《规范》)进行,检测的实验室须经当地卫生行政部门审批合格,从事艾滋病检测工作的技术人员须接受专门的技术培训,并获合格证书,诊断试剂应选择高敏感和高特异的,筛查呈阳性反应的需用特异性更强的方法(如:免疫印迹试验)进行确认,整个实验过程应有严格的质量保证体系。

二、 HIV 抗体检测

目前国外用于 HIV 抗体筛查的方法很多,根据检测原理不同分为酶联免疫吸附法、凝集法和层析法,可对血液、唾液和尿液标本进行常规或快速检测。在实际工作中常用的有酶联免疫吸附试验( ELISA )、明胶凝集试验和各种快速诊断试剂。自 1985 年第一代 ELISA 试剂问世以来,随着医学技术的飞速发展,包被抗原已从一代的全病毒裂解物发展为目前以基因重组和多肽抗原包被和标记、有着良好敏感性和特异性的三代双抗原夹心试剂,检测亚型包括 HIV-1 、 HIV-2 和 HIV-1 型的 O 亚型,窗口期由 10 周缩短至 3-4 周。为避免窗口期传染,荷兰、法国等国已研制出第四代以重组的多肽抗原和抗 P24 抗体包被的双抗原夹心法试剂盒,可同时检测抗原抗体,使窗口期缩短了 2-3 周,但其临床价值有待评估。按《规范》要求,我国采供血机构进行血液筛查和各医疗卫生机构常规筛查检测宜采用 ELISA 法,自采自供血的单位必须进行 HIV 抗体检测,在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区或大医院急诊手术前可由经过培训的技术人员在规定的场所用快速试剂进行血液筛选。对用 ELISA 试剂或快速诊断试剂进行的筛查实验如呈阴性反应,即报告 HIV 抗体阴性;对呈阳性反应的标本,筛查实验室应用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测,如两种试剂复测均呈阴性反应,则报告 HIV 抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确认。筛查试剂必须是 HIV-1/2 混合型、经国家药品监督管理局( SDA )注册批准、批批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。

HIV 抗体筛查呈阳性反应的标本由于存在假阳性的可能,必须做确认试验。国际上有 3 种确认试验方法,包括免疫印迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验,目前以免疫印迹试验最为常用。确认试剂必须经 SDA 注册批准。免疫印迹试剂有 HIV-1/2 混合型和单一型,按《规范》要求,一般先用 HIV-1/2 混合型试剂进行检测,根据《规范》中判定免疫印迹试验结果的基本原则并参照所用试剂说明书综合判定,无 HIV 抗体特异带出现的报告 HIV 抗体阴性;出现 HIV 抗体特异带,符合 HIV-1 抗体阳性判定标准,则报告 HIV-1 抗体阳性。如出现 HIV-2 型的特异性条带,需用 HIV-2 型免疫印迹试剂再做单一的 HIV-2 型抗体确认试验,呈阴性反应,报告 HIV-2 抗体阴性;呈阳性反应的则报告 HIV-2 抗体血清学阳性,如需鉴别应进行核酸序列分析。如果出现 HIV 抗体特异带,但带型不足以判定为阳性,则判为 HIV 抗体不确定。对 HIV 抗体不确定者应按《规范》要求进行随访,必要时可做 HIV-1 P24 抗原或核酸测定,但检测结果只能作为辅助诊断依据,确认报告要依据血清学随访结果。

由于目前唾液检测试剂的敏感性和尿液检测试剂的特异性明显低于血液检测试剂,故我国 SDA 已注册批准的 HIV 抗体筛查和确认试剂只能用于血液标本检测。

三、 HIV 抗体检测的质量控制

在所有实验中必须包含有内部对照质控血清和外部对照质控血清。

内部对照质控血清指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质量控制的基础,每次检测必须使用内部对照,而且只能在同批号的试剂盒中使用。

外部对照质控血清是由实验室设置的弱阳性对照,一般以该试剂盒临界值( Cut off )的 2-3 倍为宜。该血清可到专门单位购买,也可由实验室自己制备。制备方法是:收集 HIV 抗体阳性和阴性血清, 56 ℃ 30min 灭活, 3000rpm 离心 15min ,弱阳性对照可以用 HIV 抗体阴性的健康人血清梯度稀释 HIV 抗体强阳性血清、或用试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清混合并标定后得到,一般按一年使用量配制,用 0.2 μ m 滤膜过滤除菌,按一周实验用量分装、分类、标记并封口, -20 ℃ 冻存。该血清不可反复冻融,融化后应存放 2 -8 ℃ ,一周内使用。原则上每次实验必须使用外部对照质控 血清,以便监控本次实验的重复性和稳定性,同时了解各批试剂盒的批间差异,绘制质量控制图。

四、 HIV-1 P24 抗原检测

HIV 感染人体后有一段窗口期,在这段时期病毒抗体不能被检出,但可以检测到病毒相关抗原或分离病毒。故在窗口期检测抗原是早期辅助诊断和缩短窗口期的一种方法,在感染早期和发病期抗原检出率相对较高。 HIV-1 P24 抗原检测还适用于: HIV-1 阳性母亲所生婴儿的早期辅助鉴别诊断;第四代 HIV-1 抗原 / 抗体 ELISA 试剂检测呈阳性反应、但 HIV-1 抗体确认阴性者的辅助诊断;监测病程进展和抗病毒治疗效果。

P24 抗原检测一般用 ELISA 双抗体夹心法试剂,必须经过 SDA 批准注册。

HIV-1 P24 抗原的阳性结果必须经过中和试验确认 , 该结果仅作为 HIV 感染的辅助诊断依据,不能据此确诊; HIV-1 P24 抗原检测阴性只表示在本试验中无反应,不能排除 HIV 感染。

五、 HIV 核酸检测

HIV 核酸检测,通常是检测 HIV RNA ,以前只能定性检测血液中是否存在病毒核酸,而目前的技术可定量检测血液中病毒复制水平。 HIV 核酸定性检测可用于 HIV 感染的辅助诊断,如窗口期辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程等。通常使用 PCR 或 RT-PCR 技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。 HIV 核酸定量检测多用于监测 HIV 感染者的病程进展和抗病毒治疗效果,目前常用的测定方法有逆转录 PCR 实验( RT-PCR )、核酸序列扩增实验( NASBA )、分支 DNA 杂交实验( bDNA )等。在不同 HIV 定量检测方法的选择中,由于目前用于统一不同定量方法检测值的标准品尚未问世,因此不同定量方法结果之间还无法直接进行比较,建议同一病人治疗前后用同一方法进行 HIV 定量检测。

值得注意的是, HIV 核酸定性检测阴性,只可报告本次实验结果阴性,但不能排除 HIV 感染; HIV 核酸检测阳性,可作为诊断 HIV 感染的辅助指标,不能单独用于 HIV 感染的诊断,报告定性检测结果时还应注明反应条件和所使用的引物序列。报告 HIV 核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注明使用的试验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平,低于最低检测限的结果不能排除 HIV 感染。

六、 CD4 T 淋巴 细胞计数

CD4 T 淋巴细胞计数是艾滋病诊断、疾病分期、制定抗病毒治疗和预防机会性感染方案的实验室标准指标,美国 CDC1993 年修订的青年 / 成人艾滋病监测病例分类及扩大的诊断标准是:无症状 HIV 感染期( A 1 、 A 2 ): CD4 绝对数≥ 500/mm 3 或 CD4 百分率≥ 29% ;有症状感染期( B 1 、 B 2 ): CD4 绝对数 200-499/mm 3 或 CD4 百分率 14-28% ; AIDS 期( A 3 、 B 3 、 C 1-3 ): CD4 绝对数< 200/mm 3 或< 14% 。 CD4 T 淋巴细胞计数也是与病毒载量相配合预测疾病进程的可靠指标,这两个实验可以相互独立预测艾滋病临床过程和生存期。检测 CD4 细胞数的标准方法是流式细胞仪。影响 CD4 细胞数的因素有季节、昼夜差、某些并发症和皮质醇类药物等,而性别、成人年龄、紧张、生理性应激和妊娠对 CD4 的细胞数影响不大。由于 CD4 百分数受变异影响较绝对数小,故 CD4 细胞百分率有时比绝对数对临床更有意义。

七、病毒变异和耐药性的测定

随着 HAART 治疗的广泛开展,病毒变异和耐药株正在不断出现,甚至对一个药物的耐药可引起多种药物的交叉耐药。因此近年来各国相继建立起病毒变异和耐药的测试方法,目前常用的方法包括基因型 HIV 耐药测试和表型 HIV 耐药测试。 表型 HIV 耐药性测试方法能直接测出 HIV-1 对药物的敏感度,并能揭示事先存在或交叉的耐药情况,有利于指导 HIV-1 感染者有效地用药。目前市面上供应试剂盒已有 2 种,即 AV ( Vicro Antivirogram )和 PS ( Virologic PhenoSense ),两者方法均应用从生长于载体中的 HIV-1 而获得的重组病毒和病人标本中蛋白酶与逆转录酶序列,分析与野病毒之间 IC50 值相差倍数,一般达 5—10 倍以上为阳性。这种方法的最大优点是可以获得各种药物耐药量度数据,但不足的是试验慢又昂贵,技术要求高。当病毒对某些药物产生耐药性时,病毒基因会发生一些明确的突变。病毒耐药基因型的检测有助于预测某些药物的治疗效果。基因型 HIV 耐药性测试方法是通过从病人血液标本中分离到的 HIV 基因物质,应用核酸酸序列分析或杂交技术以确定病毒变异的位点,并可参考已有数据库按不同亚型进行比较。在确认变异后,与既往耐药或交叉耐药研究比较,间接地估计药物耐药情况,简单快速,费用低。缺点是能确认所分离到的基因变异,但无法指出药物耐药的程度。

应当强调的是,我国自 1995 年进入艾滋病流行的快速增长期,感染者中约 70% 为经静脉吸毒等血液途径感染,按艾滋病自然病程,近 1-2 年将会出现艾滋病的发病高潮,医院系统所承担的艾滋病检测工作将愈来愈重,因此各医院检验科应严格按《规范》要求,通过 HIV 抗体筛查和确认试验提供准确的 HIV 感染诊断,通过 CD4 T 淋巴细胞计数和 / 或 HIV 核酸定量检测为艾滋病诊断、判断疾病进展和抗艾滋病治疗疗效观察提供可靠的实验室数据。

怎样预防艾滋病?

艾滋病虽然是一种危险的传染病,但却是可以预防的,只要每个人都掌握预防艾滋病的知识,注意如下事项,就可以把传染艾滋病的危险性减少到最低限度。
(1)艾滋病主要通过三种途径传播:性接触、血液和母婴传播。
(2)预防经性途径传染艾滋病首先是洁身自爱、遵守性道德,其次是正确使用避孕套。使用避孕套不仅可以避免怀孕,还可以预防性病和艾滋病。
(3)预防经血液途径传染艾滋病首先是不要吸毒,特别是不能共用注射器或使用未消毒的注射器静脉注射毒品:避免使用未消毒的器械拔牙和其他侵入人体的操作,避免使用不安全的血液和血液制品。不到消毒不严密或不消毒的理发店和美容店去理发或美容:不要用不消毒的针穿耳,不要文身:浴室的修脚刀一定要消毒:刮脸刀、电动剃须刀必须每个人自备专用,不可借用:在救护流血伤员时,要设法防止血液直接沾在自己的皮肤或粘膜上。
(4)已感染艾滋病病毒的妇女避免怀孕和哺乳可以预防经母婴途径传染艾滋病。
(5)已感染艾滋病病毒的人在发展成艾滋病病人以前通常可以没有任何症状地生活很多年,外表看上去完全正常,但他们能够将病毒传染给其他人。
(6)与艾滋病病人及艾滋病病毒感染者的一般生活工作接触1是不会传染上艾滋病的,不必恐惧与艾滋病病人接触。

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