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中药鉴定(三)-中药显微鉴定

医案日记 2023-05-09 09:57:56

中药鉴定(三)-中药显微鉴定

主要是利用显微镜观察药材的内部组织构造、细胞形状及其后含物的特征,用以鉴定药材的真伪和纯度,甚至品质。同时,应用显微化学的方法还可以确定某些成分在组织中的分布,对指导药材的鉴定、采收、功工和贮藏都有参考价值。对于仅通过性状不易识别的药材、性状相近的多来源药材或切碎和粉末状态的药材,以及用粉末制成的中药成方制剂,显微鉴定尤其重要。

(1)药材的显微鉴定

根据观察的对象和目的,制作不同的切片,如横、纵切片,表面片,解离组织片,粉制片,花粉粒与孢子制片等,并配合各种组织、细胞或后含物的透化剂、染色剂、显色剂,可以达到对药材的有效鉴定。如大黄的大型簇晶,甘草的晶鞘纤维,黄连的黄色石细胞,人参的树脂道,何首乌、牛膝的异常构造,华山参的木内韧皮部,贝母的淀粉粒,麻黄的气孔,松花粉的花粉粒,金银花的毛茸等都有独特之处;来源于四科的大青叶可通过叶表面观的气孔式、毛茸、结晶等相互区别。

由于扫描电子显微镜的应用,使显微鉴定的水平进一步提高,而且,药材不需制作切片和染色,即可直接进行表面或断面的观察,获得细微的三维结构特征。如党参、何首乌、鸡血藤的导管,石斛的叶鞘,白头翁的叶柄基(白毛),红花、金银花、洋金花的花粉粒等的超微结构,都提供了新的显微鉴别依据。

(2)中药成方制剂的显微鉴定

中成药多有粉末直接入药者,常由数种、十几种及至数十种粉末药材组成,素有“丸、散、锭、丹,神仙难辨”之说。然而,通过掌握各组成药材的组织粉末特征,完全可以对中成药进行显微鉴定。如徐国钧等在50年代首先进行了“南京灵应痧药”的显微鉴定,成功地检出了麝香、蟾酥、天麻、麻黄、苍术、甘草、丁香、大黄、雄黄、朱砂等组成药物。其他如六味地黄丸、十全大补九、海马补肾丸、石斛夜光丸的鉴定,特别是《中华人民共和国药典》(1995年版)收载的最大复方“再造丸”,共由58味植、动、矿物药组成,能够逐一检出对应于每一组成药材的细胞组织特征。显微鉴定对于中成药的鉴定,至今仍不失为行之有效的方法。

中草药及成方制剂显微鉴别法介绍

显微鉴别系指用显微镜对药材的切片、粉末、解离组织或表面制片及成方制剂中药味的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。

鉴别时选择有代表性的样品,根据各该药材鉴别项的规定制片。成方制剂根据不同剂型适当处理后制片。

一、横切片或纵切片:选取药材适当部位,软化后用徒手或滑走切片法,切成10~20μm的薄片,选用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其它试液处理后观察。必要时可包埋后切片。[医 学教育网 搜集 整理]

二、粉末制片:取粉末少量,置载玻片上,摊平,选用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其它适当试液处理后观察。

三、表面制片:将样品湿润软化后,切取一部分或撕取其表皮,加适宜的试液观察。

四、解离组织片:如样品中薄壁组织占大部分,木化组织少或分散存在,可用氢氧化钾法;如果品坚硬,木化组织较多或集成较大群束,可用硝铬酸法或氯酸钾法。在解离前,应先将样品切成宽或厚约2mm的小条或片。

1.氢氧化钾法

置样品于试管中,加5%氢氧化钾溶液适量,加热至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去碱液,加水洗涤后,取出少量置载玻片上,用解剖针撕开,以稀甘油装置观察。

2.硝铬酸法

置样品于试管中,加硝铬酸试液适量,放置,至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤后,照1.法操作装置。

3.氯酸钾法

置样品于试管中,加硝酸溶液(1→2)及氯酸钾少量,缓缓加热,待产生的气泡渐少时,再及时加入氯酸钾少量,以维持气泡稳定地发生,至用玻璃棒挤压能离散为止,倾去酸液,加水洗涤后,照1.法操作装置。

五、花粉粒与孢子制片:取花粉、花药(或小的花朵)或孢子囊群(干燥样品浸于冰醋酸中软化),用玻璃棒捣碎,过滤于离心管中,离心,取沉淀加新鲜配制的醋酐与硫酸(9∶1)的混合液1~3ml,置水浴上加热2~3分钟,离心,取沉淀,用水洗涤2次,加50%甘油与1%苯酚3~4滴,用品红甘油胶封藏观察。也可用水合氯醛试液装置观察。[医学教育网 搜集 整理]

六、细胞及细胞内含物等的测量:在显微镜下测量细胞及细胞内含物等的大小,可用目镜测微尺测量。先将目镜测微尺装入目镜内,用镜台测微尺标化。标化时,转动目镜,移动镜台测微尺,使两种量尺的刻度平行,左边的“0” 刻度重合,再找第二条重合刻度。根据两条重合刻度间两种量尺的小格数,计算出目镜测微尺每小格在该物镜条件下所相当的大小(μm)。测量时,以目镜测微尺测量目的物的小格数,乘以每一小格的大小(μm)。通常是在高倍物镜下进行,但欲测量较长的如纤维、非腺毛等的长度时,则以在低倍物镜下测量较为方便。记录值与最小值(μm),可允许有少量略高或略低于药典规定的数值。

七、细胞壁性质的检定:

1.木质化细胞壁

加间苯三酚试液1~2滴,稍放置,加盐酸1滴,因木化程度不同,显红色或紫红色。

2.木栓化或角质化细胞壁

加苏丹Ⅲ试液,稍放置或微热,显橘红色至红色。

3.纤维素细胞壁

加氯化锌碘试液;或先加碘试液湿润后,稍放置,再加硫酸溶液(33→50);显蓝色或紫色。

4.硅质化细胞壁

加硫酸无变化。

八、细胞内含物性质的检定:

1.淀粉粒

(1)加碘试液,显蓝色或紫色。

(2)用甘油醋酸试液装置,置偏光显微镜下观察,未糊化的淀粉粒显偏光现象;已糊化的无偏光现象。

请问中药主要有哪几种鉴定方法?

中药材的鉴别方法有很多,通常可分为对植物自然形态的鉴别,对炮制药材外表性状的鉴别,用显微镜观察微观结构的鉴别,以及化学分析、生物测定等鉴别方法。其中最主要、也是最常用的,还是中药材的经验鉴别法,也就是对药材的外观性状的鉴别。
以下几种常用而简单的鉴别方法:?
一、看外观,注意观察药材的外表特征,如表皮、颜色、形状、粗细、断面等等。
1、看药材的表面。不同种类的药材由于用药部位的不同,其外形特征会有所差异。如根类药材多为圆柱形或纺锤形,而根茎类药材都有较多的茎痕,皮类药材则多为卷筒状,等等。另外,一些药材有着它们自己特定的表面特征,或光华、或粗糙、或长有鳞叶、皮孔、茸毛和突起等。比如海马的外形就被总结成为“马头蛇尾瓦楞身”,羚羊角长有“通天眼”,防风长有“蚯蚓头”等。这些特征都是鉴别道地药材真伪优劣的重要依据。
2、看颜色。药材颜色的不同或变化,不仅与它的品种和本身的质量有关,不适当的加工和储藏方法也会直接影响药材的色泽,因此颜色是鉴别药材的重要因素。我们可以通过对药材外表颜色的观察,分辨出药材的品种、产地和质量的好坏。比如,黄连色要黄,丹参色要红,玄参色偏黑等。
3、看断面。无论植物也好,动物也好,都是由一层层的组织器官构造而成的,当药材被切开,这一层层的构造就会清晰地展现出来,就像古树的年轮一样。很多药材的断面都具有明显的特征,而这些特征就是药材内部构造的直接体现。我们可以清楚的看见各种分层、纹路和不同形状的小点。比如在防己断面上能看见明显的车轮纹理,而黄芪的折断面纹理呈“菊花心”样,杜仲在折断时更有胶状的细丝相连,等等。这些独有的断面特征是鉴别药材的重要依据。
用手感受药材的软硬、轻重,疏松还是致密,光滑还是粘腻,细致还是粗糙,以此鉴别药材的好坏。不同药材的质感是不一样的,即使是同一种药材,由于加工炮制的方法不同,也会有较大的差异。如荆三棱坚实体重,而泡三棱则体轻;盐附子质软,而黑附子则质地坚硬。
三、口尝和鼻闻。
药材的气味与其所含的成分有关,鼻闻是比较重要的鉴别方法,尤其对于鉴别一些有浓郁气味的药材是很有效的,如薄荷的香、鱼腥草的腥、阿魏的臭等等。口尝法鉴别药材的意义不仅在于味道还包括“味感”,味分为辛、甘、酸、苦、咸五味,如山楂的酸、黄连的苦、甘草的甜等。味感则分为麻、涩、淡、滑、凉、腻等。药材的味感和所含的化学物质也有密切关系,在中药材口尝鉴别的实践中,可按药材的品种和质量分类进行判断。
四、水试和火试。
有些药材放在水中,或用火烧灼一下会产生特殊的现象。如熊胆的粉末放在水中,会先在水面上旋转,然后成黄线下沉而不会扩散。麝香被烧灼时,会产生浓郁的香气,燃尽后留下白色的灰末。这些特殊的现象都与药材内所含的化学成分有密切的关系,是常用的鉴别方法。?

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