离子交换色谱法一步纯化PK简单易控

上海松力生物技术有限公司与上海第一生物化学药业公司日前采用离子交换色谱法制备出比活达300单位/毫克蛋白质的高纯度胰激肽原酶（PK）。研究人员称，这一工艺操作简便、易控，适用于大生产，至今在国内还未见相关研究结果的报道。

胰激肽原酶（PK）又称为胰激肽释放酶（商品名为血管舒缓素），其普遍存在于人体的胰脏、颌下腺与唾液中，其中以胰脏中含量最高。PK在体内作用于激肽原释放出激肽，从而起到扩张毛细血管、增加血管的通透性、改善微血管循环、调整血压的作用。其还可作用于活化因子激活纤溶酶原，缺乏这一因子将使纤溶时间延长。

据技术人员介绍，提纯PK的方法很多，但在1998年一些相关研究进展使该品比活提高后，近年来相关工艺研究较少。

研究人员采用离子交换树脂120毫升处理PK粗品3克，上样时峰形很好，各种蛋白质峰充分拉开，而PK的活性峰集中在3、4号峰上。用丙酮沉淀后，效价近300单位/毫克，这为制备高纯度的PK提供了可能。同时，其他蛋白质峰的峰形也保持很好，从而有助于实现在分离PK的同时分离出其他有用的蛋白酶，实现多酶联产。

在该工艺流程中，上样量与树脂体积比为1誜25，上样量大是该方法用于大生产的优势。另外，在纯化中间体的过程中，流速可达3毫升/分钟以上，这种快速的处理方法可使生产周期大为缩短，而且采用这种方法纯化中间体只需一步就可获得符合中国药典要求的产品，方法简便、易控。

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