乙肝基因治疗研究获进展

由山东省立医院科研中心王延军博士和孙斌主治医师承担的一项山东省卫生厅计划课题——“B7-2对HBV基因疫苗诱导产生细胞免疫应答的影响”，近日通过了山东省卫生厅主持的科技成果鉴定。

慢性乙型肝炎是严重影响我国人民健康的常见病和多发病，目前乙肝病毒（HBV）表面抗原在一般人群中携带率高达9.09%，但至今对其仍无满意的治疗方法，尤其对处于免疫耐受状态的慢性HBV携带者，更是临床的治疗难题。近年来国内外专家针对该病毒的致病机制，对如何打破乙肝病毒的免疫耐受做了大量的研究工作，现已成为当前专家们关注的热点。基因疫苗（又被称为DNA疫苗）作为新的生物治疗技术，可在诱导体液、细胞免疫应答方面发挥重要作用，更由于它比传统蛋白质疫苗诱导的免疫反应持续时间长，且具有一定的安全性，因此在抗感染、抗肿瘤等免疫研究中备受关注。

在动物实验中，王延军博士的这项研究利用基因转导技术，将基因工程构建的基因疫苗免疫小鼠，证实了B7-2真核表达质粒为佐剂与目的疫苗共免疫，两者结合可有效增强其特异性免疫应答。这种共免疫策略为增强抗HBV特异性细胞免疫应答的抗HBV治疗新途径提供了有意义的理论和实验依据。上述研究结果为临床医生提供了一个全新的具有广阔的临床研究与应用前景的抗HBV治疗新理念及方法。

在临床试验中，王延军博士等首先采用免疫荧光技术，分别对50例慢性活动性肝炎患者和50例肝癌患者组织切片中B7-2分子的表达情况进行检测，观察到前者B7-2表达显著高于后者，揭示了其在增强T细胞特异性免疫应答中的重要作用。然后采用基因转染技术，将B7-2表达质粒pcB7-2转染至人肝癌HMC7721细胞中，流式细胞仪检测证明了B7-2分子可在真核细胞中表达。在此基础上，将B7-2（pcB7-2）和HBV(pcSS2)DNA疫苗，先后共免疫小鼠，观察到pcB7-2增强了HBV迟发性超敏反应(DTH)和抗HBV的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性。证明HBVDNA疫苗能够诱导一定水平的DTH应答和CTL活性，当HBVDNA疫苗与B7-2表达质粒共免疫时，特异性细胞免疫应答则显著增强，表明共免疫的B7-2表达质粒激活了CTL的裂解活性。这样为逆转慢性乙肝患者的免疫耐受，增强免疫系统对乙肝病毒的免疫识别和效应功能，彻底治愈乙型肝炎提供了良好的前景。

鉴定专家组认为，该课题所得成果为抗HBV的基因疫苗联合免疫治疗提供了新思路，具有良好的应用价值。

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