新加坡研制出快速ＤＮＡ检测器

新加坡研制出快速ＤＮＡ检测器

新加坡微生物研究所研究人员最近利用生物芯片技术，研制出一种快捷有效的ＤＮＡ（脱氧核糖核酸）检测器，它只需一滴血，即能在两小时之内知道ＤＮＡ检测结果。

据新加坡《联合早报》８日报道，这种检测器的优点是能快速地将含有ＤＮＡ的白细胞与红细胞进行分离。其生物芯片可以先将白细胞过滤出来，然后从中提取出ＤＮＡ，再进一步进行分析即可，从而将以往长达两天的检测过程缩短到不足两小时。该检测器只有一个公文包大小，而且一般医疗人员或诊所的护士都可以操作。

新加坡微生物研究所目前已经授权当地一家生物科技公司生产这种检测器，估计可在今年年底之前推向市场。

高通量DNA测序和基因组学新型技术的目录

现有技术
第一章概述：DNA测序技术进展
1　引言
1.1　超高通量测序能力的生物技术意义
2　测序前沿技术
2.1　毛细管电泳和Sanger测序法
2.2　高通量毛细管微阵列测序
2.3　染料和检测器
2.4　微型芯片电泳
2.5　基于微型毛细管芯片的毛细管电泳测序
2.6　质谱测序
3　固相阵列测序装置
3.1　超敏感的检测器和测序仪
3.2　合成测序
3.3DNA单分子测序
3.4　杂交重组测序
4　技术展望
4.1　纳米孔膜
4.2　DNA合成的直接电学检测
5　基因组短片段测序应用
5.1　基于重测序的基因分型
5.1.1　polony基因分型
5.1.2　焦磷酸测序的基因分型
5.1.3　多态性比率测序
5.1.4　BEAMing
5.2　古生物基因组
5.3　洞人基因组
5.4　元基因组
5.5　重复DNA序列的SAM测序
5.6　转录组和表达RNA序列分析
5.7　MPSS和基因组分析
5.8　光学定位
6　小结
参考文献
第二章　芯片毛细管电泳与系统遗传分析系统
摘要
1　引言
1.1　各种基于芯片的毛细管电泳系统
2　芯片设计和流体操作
2.1　芯片设计
2.2　流体操作
3　材料和制作
3.1　材料
3.2　制作
3.2.1　玻璃材料的制作步骤
3.2.2　高分子材料的制作步骤
4　检测
4.1　光学检测
4.1.1　激光诱导的荧光检测
4.1.2　吸光度检测
4.1.3　化学发光检测
4.2　电化学检测
4.2.1电流检测
4.2.2电导检测
4.2.3电位检测
4.3　质谱
5　表面修饰
5.1　动态包被
5.1.1　玻璃/石英基片的包被
5.1.2　PMMA基片的包被
5.1.3　PDMS基片的包被
5.2　永久性包被
5.2.1　玻璃/石英基片的永久包被
5.2.2　PMMA基片的永久包被
5.2.3　PDMS基片的永久包被
6　应用
6.1　核酸分析
6.1.1　筛分介质
6.1.2　依大小排列DNA片段
6.1.3　基因分型
7　DNA测序
……
第三章　应用MALDI-TOF质谱法比较序列分析——利用知己序列寻找新的序列
第四章　基于核苷酸偶联染料的DNA测序进展
合成测序技术平台
第五章　454生命科学（454LifSciences）皮升级测序系统
第六章　合成法DNA测序的集成系统
单分子测序
第七章　单分子荧光显微镜及其在基于循环合成的单分子测序中的应用
第八章　基于单个DNA链的纳米级核苷酸序列快速测序
第九章　全基因组水平的单分子测序系统
序列验证和分析
第十章　测序和诱导突变相结合有利于短读长获得全新百万级的DNA片段序列
第十一章　基因组测序和拼接
第十二章　具有高污染风险的样品——古DNA和环境DNA核酸序列信息的有效测定

法医常用的DNA检测试剂盒及其原理

原理

细胞核染色质DNA断裂是细胞凋亡的标志特征。在细胞发生凋亡时，核酸内切酶被激活，选择性降解染色质DNA，形成50-300 kb的大片段，并进而在核小体连接处断裂，形成180-200 bp或其整倍数的DNA片段，这些DNA片段可从细胞中提取出来，通过琼脂糖凝胶电泳，溴化乙啶染色呈现为梯状条带（DNA Ladder），并据此判断细胞凋亡产生。凯基细胞凋亡DNA Ladder检测试剂盒提供了一种简便、快速地提取染色质DNA的方法，并增加对小片段DNA的回收，从而增强了检测的敏感性。
操作步骤

1． 离心收集105~106细胞（1500×g，5min）于1.5mL微量离心管中；

2． 用PBS洗涤细胞二次（离心1500×g，5min），弃上清；

3． 沉淀的细胞中加入100μL Lysis Buffer，涡旋振荡器上剧烈混合10秒，离心1000×g，5min）移上清于另一1.5mL微量离心管中；

4． 沉淀再加入100μL Lysis Buffer重复上步，合并两次的上清液；

5． 在上述合并的上清液中加入20μL Solution A，再加入20μL Enzyme A， 55℃反应1小时；

6． 加入20μL Enzyme B,37℃，1小时；

7． 加入130μL Precipitant和950μL冷乙醇, 混匀， 置—20℃,1小时以上或过夜；

8． 4℃，12，000-14，000 rpm离心15-30min，小心地弃去上清，收集沉淀的DNA；

9． 加入0.5mL 70%的冷乙醇，洗DNA沉淀，再12，000-14，000 rpm离心20min；

10．弃上清，DNA沉淀于室温干燥10 min后，加入10-15μL TE Buffer，充分搅拌溶解DNA；

11．取上述10-15μL样品加入2-3μL Loading Buffer， 1.5%琼脂糖凝胶电泳（凝胶和电泳缓冲液TBE均加入0.5μg/mL的溴化乙啶）;

12．5V/cm电泳1小时，紫外灯下观察并拍照。

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