多囊蛋白-1(PC1)是表达于发育肾脏肾小管上皮细胞和其他管状结构上的一种膜蛋白。最近的研究表明这种蛋白可能在调节多种类型细胞内Ca(2+)水平方面具有重要作用,但是在肾脏上皮细胞方面尚缺乏资料。
意大利费拉拉大学普通病理学部生物化学与分子生物学科的Aguiari G及其同事研究了PC1细胞浆段对人类肾脏上皮细胞HEK-293细胞系中储存Ca(2+)通道活性的作用。他们将PC1细胞浆段1-226氨基酸或26-226氨基酸与人类Trk-A受体跨膜区融合,形成嵌合蛋白,并短暂转染至细胞。他们对TrkPC1野生型和对照Trk剪切肽的表达及其在胞浆中的定位进行观察分析。
他们还在应用PC1嵌合体共转染的细胞中检测细胞Ca(2+)。根据ATP磷酸肌醇途径的激活程度,细胞胞浆Ca(2+)-敏感光蛋白与细胞内储存的Ca(2+)一起释放。
他们发现,TrkPC1多肽的表达可使ATP引起的胞浆Ca(2+)浓度增加,而其剪切体的表达则无此作用。HeLa细胞内Ca(2+)储存远大于HEK-293所储存的Ca(2+)。对HeLa细胞内Ca(2+)进行检测时发现,TrkPC1的表达可增强由组胺激发的胞浆内Ca(2+)的增加,甚至即使在细胞外Ca(2+)不存在的情况下也同样可增加胞浆内Ca(2+)浓度。
Aguiari等总结认为,这些观察结果表明肾脏内及其它上皮细胞中的PC1C末端不仅可上调Ca(2+)通道活性,也可能涉及细胞内储存的释放。
尿液常规分析是我们经常做的一项检查。大多数医院都用尿液分析仪检测,检测项目目前有10项、11项或12项,并且报告的格式不统一,既有“+”(阳性)、“-”(阴性),又有数字,检验项目的单位也不一样。到底该怎么阅读尿检报告呢?
尿常规项目大致可分为四大类:肾病类、糖尿病类、泌尿感染类以及其他疾病类。
肾病类项目
酸碱度(pH)、比重(SG)、隐血或红细胞(BLD、ERY)、蛋白质(PRO)和颜色(COL)。正常参考值分别为:4.6~8.0、1.005~1.030,阳性、阴性,淡黄色至深黄色。这些指标的改变可能提示有肾功能损害。
糖尿病类项目
酸碱度(pH)、蛋白、比重、糖(GLU)和酮体(KET)。这些指标的检测有助于诊断相关并发症和机体一些器官是否受到损害,如是否出现酮血症等。正常情况下,尿糖和酮体为阴性。
泌尿感染类项目
白细胞(WBC)、隐血或红细胞、亚硝酸盐(NIT)、颜色和浊度(TUR)。当泌尿系统受到细菌感染时,尿中往往出现白细胞和红细胞,尿液颜色或浊度也发生改变,亚硝酸盐有时也会为阳性。化学检测尿白细胞和隐血或红细胞只起过筛作用,临床诊断以镜检结果为准。
其他疾病类项目
主要是酸碱度、比重、胆红素(BIL)、尿胆原(URO)、颜色及其他指标。胆红素和尿胆原两项指标反映肝脏代谢血红素的能力和数量。正常情况下,尿胆红素为阴性,尿胆原为弱阳性。以上指标增高时,往往提示黄疸,尿液颜色呈黄绿色。
尿液常规分析化验单上一些项目后面出现“+”或“+++”……或数字,表明程度不同,这在医学上叫阳性结果;相反,“-”就称阴性结果。在阅读报告时,要客观地分析报告,因为有许多干扰因素影响到检测结果的准确性,如饮食因素、尿液中的一些干扰物等。当尿常规检查出现异常时,请不要太紧张和太忧虑;同样,当出现和临床表现不一致的检验结果时,也不要盲目乐观。一定要配合临床医生做进一步的检查和分析,以免延误疾病的诊断。
怎样看懂尿常规检查报告单?
尿液常规检查是健康体检的重要项目,它不仅可反映泌尿系统疾病,对糖尿病、黄疸肝炎、胆道梗阻等多种疾病的筛选也有重要意义。
1.尿蛋白(PR0)
正常尿常规检查一般无蛋白,或仅有微量。尿蛋白增多并持续出现多见于肾脏疾病。但发热、剧烈运动、妊娠期也会偶然出现尿蛋白。故尿中有蛋白时需追踪观察明确原因。
2.尿糖(GLU)
尿糖阳性要结合临床分析,可能是糖尿病,也可能是因肾糖阈降低所致的肾性糖尿,应结合血糖检测及相关检查结果明确诊断。由于尿中维生素C和阿斯匹林能影响尿糖结果,故查尿糖前24小时要停服维生素C和阿斯匹林。
3.尿红细胞(RBC)
每个高倍显微镜视野下,尿液红细胞超过5个以上,称为镜下血尿;大量红细胞时,称“肉眼血尿”,可见于泌尿系统炎症、感染、结石、肿瘤等,应加重视,并立即到泌尿专科进一步检查,以明确血尿的部位和原因。
4.尿白细胞(WBC)
每个高倍显微镜视野下,尿液白细胞超过5个以上,称白细胞尿,大量白细胞时,称脓尿,它表示尿路感染,如肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎等。
5.尿上皮细胞(SPC)
尿液中有少量上皮细胞临床意义不大;大量出现时,如能排除阴道分泌物污染,就要考虑泌尿系统炎症存在。此时,如加做尿上皮细胞形态检查,可确定上皮细胞的来源。
6.尿管型(KLG)
尿中出现管型,特别是颗粒管型、细胞管型都是肾脏实质性病变的标志。
7.尿潜血(ERY)
正常情况尿潜血试验阴性。尿潜血阳性同时有蛋白者,首先考虑肾脏疾病和出血性疾病,可进一步做肾功能检查;如尿蛋白阴性应到有关专科查明出血部位和性质。一般认为,下尿道出血因红细胞未被破坏,潜血可不明显。
8.尿胆原(UBG)、尿胆红素(BIL)
尿胆原和尿胆红素阳性,多提示有黄疸存在,有助于黄疸的诊断和鉴别诊断。
9.尿亚硝酸盐(NIT)尿亚硝酸盐主要用于尿路感染的过筛试验。新鲜尿时亚硝酸盐呈阴性,如标本放置时间过久或有细菌生长繁殖可呈假阳性
正常尿液中含有微量蛋白质(24小时尿蛋白定量<150mg),普通检测方法不能发现,检查结果为阴性。超出此范围则可检出,称为蛋白尿。但由于尿蛋白试验只是测定一次尿的结果,易受尿液浓缩及稀释程度的影响,常常不能准确反映蛋白尿的程度。
当肾小球、肾小管发生病变时,如各期肾炎、肾病以及高血压发生肾动脉硬化时,均可出现蛋白尿;各种细菌性感染,如肾盂肾炎、肾结核、败血症等亦可出现蛋白尿;非感染性疾病,如肾结石、多囊肾、肾淀粉样变性以及休克、严重肌肉损伤、发热、黄疸、甲状腺功能亢进、溶血性贫血及白血病等,也可出现蛋白尿。
生理性蛋白尿常见于食高蛋白饮食后,精神激动、剧烈运动、长时间受寒、妊娠等,都可能出现暂性的蛋白尿,但尿蛋白定性一般不超过+。
一般说来,持续性的蛋白尿往往代表肾脏有病变。尿蛋白的多少反映了病变程度,临床可据此作疗效观察。然而,需要特别指出的是,肾小球病变到了晚期,由于大量肾单位废损,使蛋白滤出减少,尿蛋白检查反而减少或消失,这并不代表肾脏病变的减轻。 中医治疗肾病——独树一帜
血尿、蛋白尿虽然是判断肾脏病病情严重程度及其预后的重要指标,但是肾病患者不能一叶障目。数值固然重要,但更重要的是病情能得到真正好转。只要病情得到控制,潜血、尿蛋白数值自然会降下来。但现在有一些患者舍本逐末,一双眼睛死盯着数值不放,必然导致只见树木不见森林的后果。要想真正恢复健康,治病于本是最重要的。这就要求患者必须找到适合自己的方法,彻底治愈肾病。
2017检验医学知识要点集锦
172. 肾素由肾小球旁器分泌,是人体最强的升压物质,也是让肾上腺释放醛固醇的主要刺激物。
173. 垂体激素均为多肽或糖蛋白。
174. HCG、TSH、LH、FSH均由α,β两条多肽链亚基组成。且它们的α链高度同源性。
175. 生长激素(缺乏得垂体性侏儒症,GH)的促生长作用必须通过生长调节素(SM)的介导作用。SM-C及SM结合蛋白测定因其不跟GH的分泌而波动,故单次即可了解GH功能状况。
176. 催乳素瘤是功能性垂体腺瘤中最常见的,好发于女性。
177. 所有性激素都是类固醇。
178. 睾酮代谢物为雄酮是17—KS的主要来源,雌二醇(生物活性最强的天然雌激素,女性早熟指标))和雌酮代谢物是雌三醇,孕酮(确证排卵)代谢物是孕烷二醇(黄体功能指标)。
179. 测定早晨的睾酮(男青春期10—20,成年期:300—1000)水平可以对男性睾酮水平下降作出最好评价。
180. GNRH兴奋试验主要检测腺垂体促性腺的贮备功能状况。
181. 可以引起性功能紊乱的性激素合成酶有:C—17,20裂链酶,17—B羟类固醇脱氢酶,5A—还原酶。
182. 聚丙烯酰胺电泳普遍用于分离蛋白质及较小分子核酸。
183. 琼脂糖电泳适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸。
184. 等电聚焦电泳适合分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组份,分辨率最好。
免疫学
185. 免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
186. 标记免疫技术应用最多,自动化是免疫学检验发展趋势。
187. 抗原的表位至少有二种方式:顺序或线性表位,三维结构的构象表位。
188. 天然抗原绝大多数是胸腺依赖性抗原(TD—AG)。
189. 超抗原被T细胞识别时虽然要与MCHII类分子结合,但不受II类分子的限制,可以直接活化T细胞而且效率高。
190. 抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL(高变区)是抗原结合部位,CL,CH1是遗传标记所在,CH2有补体结合点,CH5能固定组织细胞,CH3和CH4还参加I型变态反应。
191. 免疫学中常用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶水解Ig分子,木瓜蛋白酶水解为2Fab+Fc,而胃蛋白酶水解为F(ab)2+nFc。
192. 免疫球蛋白的血清型有:同种型(正常个体都有)同种异型(只存在同种的某些个体中)独特型(某一个体独有的。独特性网络在免疫应答的调控中起重要作用)。
193. 天然IgG分子无活性。
IgM:五聚体,为天然凝集素和冷凝集素,是B细胞膜上主要表面膜Ig,激活补体能力最强。
IgG:单体,电泳最慢,再次免疫应答的主要抗体,至少要两分子。
194. 0.1ml的2-巯基乙醇能破坏IgM但不破坏IgG,用此方法可以区分它们。
195. 母乳中的分泌型IgA提高了婴儿出生后4—6个月内的局部免疫屏障,常称为局部抗体。
196.补体激活经典途径的固有成份按激活先后顺序为C1,C2…….C9。旁路途径直接从C3开始激活。
197. C1由C1q,C1r,C1s,三种组成。灭活的补体在片在符号前加i,有酶活性的上加一横。
198. 补体大多是糖蛋白多属β球蛋白,但C1q,C8是r蛋白,C1s,C9是a球蛋白。
199. 补体系统中C3含量最多,C2含量最少。
200. 替代途经的激活物主要是细胞壁成分。
201. 补体清除免疫复合物的方式:吞噬调理;免疫粘附;免疫复合物抑制。
202. 编码人C4,C2,B因子的基因在第六染色体短臂上与MHC的基因相邻,命名为III类组织兼容性基因。
203. 产生补体主要是肝细胞、巨噬细胞。
204. 已发现的归巢受体有:CD44,LFA-1,VLA-4,MEL-14/LAM-1等。
205. CD2表达于全部T细胞和NK细胞表面,CD3表达在全部T细胞。
206. CD4+T:又称辅助性T细胞;CD8+T:又称细胞毒性T细胞。
207. SIG的功能是作为B细胞表面的抗原受体,可与相应抗原特异性结合并将抗原内摄处理。
208. MHCII是递呈细胞(AC)递呈抗原的必须物质,是递呈细胞(有单核吞噬,树突状,B细胞)的标志。
209. 明确的白介素有15个,IL-2主要由T细胞(CD+4)受抗原或丝裂原刺激后产生。
210. II型干扰素又称免疫干扰素或IFNR,主要由T细胞产生。
211. 肿瘤坏死因子:TNFa:由细菌脂多糖活化的单核细胞产生引起出血坏死也称恶病质素,TNFb:由抗原或丝裂原刺激的`淋巴细胞产生有肿瘤杀伤和免疫调节功能又称淋巴毒素。
212. 红细胞生成素(EPO)是糖蛋白,主要由肾小管内皮细胞合成也可由肝和巨噬细胞产生。
213. 人类MHC称为HLA复合体,位于第六对染色体的短臂上。其多态性为复等位基因所致,当群体中位于同一位点的等位基因多于两种时为复等位基因,HLA的遗传特点:单倍型,共显性,连锁不平衡。HLA是体内最复杂的多态性基因系统。
214. I和II类MHC分子是引起同种异体移植排斥反应的主要抗原。
215. 当抗原递呈细胞向免疫活性细胞递呈抗原时,免疫活性细胞在识别特异性抗原时,必须识别递呈细胞上的MHC抗原称为MHC限定性。
216. 抗原—MHCⅡ类分子复合物与CD4+T细胞受体结合;抗原—MHCⅠ类分子复合物与CD8+T细胞受体结合。以上结合是使Th细胞活化的首要信号。
217. 细胞免疫的效应方式有:细胞毒,迟发超敏。体液免疫以血清中有循环抗体为特征。
炎症细胞有:中性、肥大、嗜酸、嗜碱、血小板、内皮细胞。
炎症介质:血管和平滑肌收缩介质、趋化因子、酶类、蛋白多糖。
免疫炎症类型:IgE介导,免疫复合物,细胞,皮肤嗜碱细胞型。
218. 抗原抗体结合基于结构互补与亲和性,由一级结构决定。
219. 抗原抗体结合力有:静电吸引、范德华力、氢键、疏水作用力,其中疏水作用力最强。
220. 常用佐剂有:氢氧化铝,明矾(弗氏)是目前动物免疫中最常用的。
221. 抗血清常见保存条件:4度保存;低温保存;冰冻干燥保存。
222. 抗体特异性纯化有:亲和层析,吸附法。
223. 脾淋巴细胞特征是抗体分泌功能和能在选择培养基中生长,骨髓瘤细胞则可无限分裂既永生性。
224. 细胞融合的选择培养基有三成份:次黄嘌呤(H)氨甲蝶呤(A)胸腺嘧啶核苷(T)称为HAT培养基。
225. 补体结合试验中5种成份分三个系统(反应,补体,指示),结果判定以不溶血为阳性。
226. 常用的标记酶有:辣根过氧化物酶(底物为邻苯二胺,四甲基联苯胺(常用));碱性磷酸酶(底物为磷酸酯)。
227. 酶标抗体制备常用 二醛法 及 过碘酸盐法。
228. RIA(放免)核素标记抗原,竞争抑制,2-3个数量级,标记物限量。
IRMA(免疫放射)核素标记抗体,非竞争结合,3个数量级以上,标记物过量。229. 常用的荧光素有:异硫氰酸(FITC);四乙基罗丹明(RB200);四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC);藻红蛋白(R-RE)。
230.荧光标记蛋白的常用方法:搅拌法和透析法。
荧光抗体鉴定包括效价及荧光素与蛋白的结合率,大于1:16为理想,一般固定标本的荧光抗体以F/P=1.5为宜,用于活细胞染色的以2.4为宜。
231. 时间分辨荧光免疫测定以镧系元素(如:铕)化合物为荧光标记物。
232. 偏振免疫测定的偏振波长是485nm(蓝光)。
233. 发光免疫技术:生物发光:荧火虫荧光素;化学发光底物有:氨基苯二酰肼类主要为鲁米诺及异鲁米诺衍生物、哑啶酯类;电化学发光底物为三联吡钌、三丙胺。
234. 双抗体夹心法的质控点最好是相应抗原。
235. 外周血单个核细胞的分离的分层液常用:Ficoll(由上到下为血浆,单个核细胞,粒,红)和Percoll(由上至下:死细胞,单个核细胞,淋,红,粒)。
236. 纯淋巴细胞群的采集有:黏附贴壁法,吸附柱过滤法,磁铁吸引法。亚型的分离法有:E花环沉降法,尼龙分离法,亲和板结合法,荧光激活细胞分离仪法。237. 淋巴细胞活力测定常用台盼蓝染色法,死细胞为蓝色。保存时二甲亚砚为保护剂。
238. 植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。增殖试验有:形态法(分别计数淋母,过渡性淋母,核有丝分裂相及成熟小淋,前三者为转化细胞,计200个,算转化率)、核素法。
239. SmIg(膜免疫球蛋白)是鉴定B细胞可靠的指标。
240. B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(直接法只能检测IgM生成细胞,其它用间接法,即在脾细胞和SRBC混合时加入抗Ig抗体)。
241. 测定人NK细胞活性多用以K562细胞株为靶细胞,测鼠NK细胞活性则用YAG细胞株。
242. 嗜酸粒细胞活化产物的测定:产物有:阳离子蛋白(ECP),主要碱基蛋白(MBP),X,EPD,EDN等,其中ECP毒性最强因而认为是嗜酸的特异性标志。
243. 新月体性肾小球肾炎的免疫病理类型有:免疫复合物,抗肾小球基底膜(GBM)抗体,抗中性白细胞质抗体。含有新月体的肾小球数目和比例是该病的关键。
244. 自身免疫病(AID)的特征:高滴度自身抗体,病理特点为免疫炎症损伤与抗原分布一致,能建动物模型。
248. 抗乙酰胆碱受体抗体:对重症肌无力(MG)具有诊断意义。
249. 抗核RNP抗体:为MCTD(混合性结缔组织病)的诊断指标。
250. 抗SSA/抗SSB抗体:为干燥综合征(SS)的诊断指标。
251. 抗Jo-1抗体:多发性肌炎(PM)患者常为阳性。
252. 抗Scl-70抗体:进行性系统性硬皮症(PSS)的诊断指标。
253. 内风湿性关节炎(RA):自身抗体有RF、抗角蛋白抗体(AKA)。其中AKA为RA的确诊指标,而RF为初筛指标,因为RF还可出现于其它的自身免疫性疾病。
254. Farr法测定dsDNA抗体的特异性高,为公认标准法,当抗dsDNA抗体结合率大于20%时对SLE有意义。
255. 多发性骨髓瘤(最常见免疫增殖病)以IgG型最常见;IgM型容易引起高粘滞血症;IgE型罕见,且易并发浆细胞白血病;轻链型易并发肾功能不全。
256. 重链病类别常见γ链(IgG),α链(IgA),μ链(IgM)三型。
257. 原发性B细胞缺陷病类型:全Ig缺失(BROTON病,女带,男患病,最先考虑测Ig浓度,CD分子,SmIg);部分Ig缺失;Ig正常但无抗原反应。
258. 原发性T细胞缺陷病:易并发移植物抗宿主反应(GVHR)。T细胞缺陷常同时伴有体液免疫缺陷。
259. 原发性联合免疫缺陷病,以重症联合免疫缺陷(SCID)的预后最差。
260. 在原发性免疫缺陷病中,以补体缺陷发病率最低。
261. 只有感染了乙肝才能感染丁肝。
262. 艾滋病T淋巴细胞亚群检查可发现T细胞绝对数下降,且以CD4+T淋巴细胞下降为主,CD4+T/CD8+T小于1。检测的抗体主要是P24,GP120。
263. CEA大于60μg/L时可见于结肠、胃、肺癌。手术6周后CEA水平正常。
264. 血清CEA结合甲状腺降钙素测定有助于甲状腺髓样癌的诊断和估计。
265. AFP是原发性肝癌的最灵敏最特异的标志。PSA是前列腺癌特意的指标,
266. 糖类抗原有:CA125:上皮性卵巢癌和子宫内膜癌;CA15-3:乳腺癌;CA19-9:胰腺癌、结直肠癌。
267. AFU(A—L岩藻糖苷酶)是原发性肝癌的新指标。
268. 神经元特异性烯醇化酶(NSE)是神经母细胞瘤和小细胞肺癌(基因有P53,RB)的标志物。
269. 排斥反应有:宿主抗移植反应(HVGR)和移植物抗宿主反应(GVHR)。
微生物学
270. 生物学按界、门、纲、目、科、属、种分类,种是最小单位。
271. 结核菌可利用甘油为碳源,梭状芽胞菌可以氨基酸为碳源,
272. 流行性感冒杆菌要Ⅴ,Ⅹ因子才能生长。
273. 致病性岛:由基因编码决定的一团与致病性相关的基因组。
274. 微生物超净工作台应选择垂直气流通风方式。
275. O/129抑菌试验对弧菌有用,而对气单胞菌无用。
276. 杆菌肽敏感试验:用于A群链球菌(敏感)与非A群链球菌(耐药)的鉴定。
277. 奥普托欣试验:肺炎链球菌敏感。
278. L型细菌特点:生化减弱;渗透压敏感,培养应高渗(20%蔗糖);染色不定,多为G-;形态不一(巨球形是特征);固定要用10g/L鞣酸不能用火焰;生长在增菌液中微浑、颗粒样沉淀或沿试管壁生长;返祖现象。
279. L型细菌常见菌落有三种:油煎蛋样菌落(L)、颗粒型菌落(G)、丝状菌落(F)。
280. 原生质体与原生质球都是细胞壁缺陷的细菌。
281. 肽聚糖的结构由聚糖骨架,四肽侧链和五肽交联桥(G-无交联桥)。
282. 磷壁酸为G+特有,分壁和膜两种。
283. 细菌外膜层由脂多糖,脂质双层,脂蛋白组成。细胞质内有蛋白合成地、核质(主要遗传物质)质粒、胞质颗粒,是细菌蛋白质和酶类合成的重要场所。
284. 鞭毛是由细胞质伸出的蛋白性丝状物。
285. 性菌毛仅有1—10根,毒力和耐药质粒都能通过它转移,有致病性。
286. RNA主要存在于细胞质中,占细菌干重的10%,DNA存在于染色体和质粒中。
287. G+等电点2—3,G-等电点4—5。
288. 细菌营养转运的方式有:离子,透性酶,磷酸酶。营养摄取的机制:被动扩散,主动吸收,基团转位。
289. 嗜冷菌最适温度为10—20℃,嗜温菌为20—40℃,嗜热菌为50—60℃。
290. 细菌代谢所需能量主要以生物氧化作用而来。
291. G-菌的菌体脂多糖能引起发热故称热原质。
292. 土中的厌氧芽胞杆菌是创伤感染病原菌的主要来源。
293. 1000毫升饮用水中大肠杆菌群不过3个。
294. 有芽胞破伤风菌需沸水煮三小时才杀死。
295. 水中加入2%碳酸钠能将沸点提到105度,又能防止金属生锈。
296. 紫外线波长265—266nm时杀菌力最强。
297. 无芽胞菌一般的致死为1800—6500微瓦/cm,杀死芽胞要十倍。
298. 滤菌器用于除菌的孔径是0.22微米,
299. 高压蒸汽灭菌指示生物物种:嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC7053)
紫外线杀菌指示生物物种:枯草芽胞杆菌黑色变种(ATCC9372)。
300. 细菌遗传物质主要在于染色体、质粒和转位因子中。
301. 质粒:不依赖染色体而复制,不兼容性,转移性,指令性。
主要有耐药质粒、Col质粒(编码肠毒素)、VI质粒(编码细菌与致病性有关的蛋白)。
302. 转位因子为存在于细菌染色体或质粒上的一特异的核苷酸序列可在DNA中移动,主要有三类:插入顺序(最小的转位因子)、转座子、转座噬菌体。
303. 遗传型变异机制有基因突变、基因转移、基因重组。
304. 突变:突变率由复制的准确度,DNA发生损伤的机会,及对损伤DNA修复程度来决定。一般在106--109。
305.
转化:受体菌直接提取供体菌提供的游离DNA的片段整合重组使受体菌的性状发生变异。
转导:以噬菌体为媒介,将供体菌的基因转移到爱体菌内而致受体菌基因改变,分普遍和局限。
接合:受体菌和供体菌直接接触,供体菌通过性菌毛将所带的F质粒或类似遗传物质转移到受体菌。
溶源性转换:是噬菌体的DNA与细菌染色体重组,使宿主遗传结构发生变异。
原生质融合:两种经过处理失去细胞壁的原生体混合和可发生融合后的双倍体可发生染色体间的重组。
306. 基因重组可使基因再激活表现为:交叉复活和多重复活。
307. 粘附素是细菌表面的蛋白质有菌毛和非菌毛。
308. 毒力有侵袭力和毒素。侵袭力:菌体表面结构,菌毛,侵袭性酶(凝固酶,透明质酸酶,链激酶,胶原酶等)。
细菌的内毒素一般由:脂质A(主要成份)、,非特异性核心多糖、菌体特异性多糖组成。一般7---10天后机体产生特异性免疫。IgG和IgM能在血中直接中和病毒。
309. 医院感染大多以散发形式流行。
310. 细菌分类目前国际上普遍采用伯杰分类系统,也有用CDC(USA)。
311. 日光灯波长约0.5微米。显微镜的分辩率为波长一半。
312. 荧光显微镜的光源为高压汞灯。
313. 抗酸染色步骤和时间:5%石碳酸复红(5-10min)—3%盐酸酒精(脱到无色)—吕氏美蓝(30S-1min)。
314. 糖类发酵是鉴定细菌最常用的生化反应。
315. 怀疑细菌性心内膜炎时血培养应不少于三次。
316. 血培养中,不能立刻接种的血标本应用SPS抗凝。
317. 直接镜检2h报告,最后鉴定和药敏一般不过3天,除血外,必须在24h内预报。
318. 肠杆菌科的强选择培养基(SS琼脂),弱选择培养基(EMB,麦康凯)。
319. α溶血是草绿色溶血,β溶血是透明溶血环,γ溶血红细胞不溶解,双环。
320. 细菌数量达106—107CFU/ml时培养肉汤才见混浊。
321. 血培养中有105CFU/ml时才能通过革兰氏染色检出细菌。
322. 测定病原体的感染性最好选用无菌动物或悉生动物。
323. 冷冻干燥保存法是最有效的菌种保存方法,利用各种斜面和半固体加石蜡油是最常用和最简便的菌种保存方法,一般不含糖,不用液体。
324. 真菌,霍乱弧菌,铜绿假单胞菌及粪碱需在室温保存,而脑膜炎、淋球菌、初次分离的流感嗜血杆菌应保存于37℃。同时,每转种三代要鉴定一次。
325. AMS系统是目前微生物鉴定中最常用的自动化仪器。
326. 绝大部分致病性真菌属于半知菌亚门。形态有单细胞和多细胞两种。
327. 真菌的基本结构:菌丝和孢子,鹿角状菌丝仅见于黄癣菌,假菌丝与真菌丝的主要区别是它壁两边有时交叉,是由孢子延长而来,
有性孢子有:卵生孢子,接合孢子,子囊孢子,担孢子。
无性孢子有:叶状,分生,孢子子囊。
328. 真菌最常用沙保弱氏培养基,最适温度22—28℃,最适PH5—6,培养4周以上,
329. 真菌菌落三型:酵母型,霉菌型。
可用10%氢氧化钾加热使标本透明。
330. 血清出芽试验有芽管出者为白念菌,念珠菌中仅白念菌产厚壁孢子,试管培养是真菌分离、传代、保存菌种最常用的方法。鉴定曲霉常用察氏琼脂,以烟曲霉菌居多。
331. 药敏实验:K—B法(半定量),公认的标准法,采用水解酪蛋白(M—H)琼脂,PH7.2,90mm内径,注入25—30ml琼脂,厚度为4mm,抗菌药片直径6.35mm,吸水量20微升。0.5麦氏比浊管相当于1.5X108/ml。校正后的菌液应在15分钟内接种。各药敏纸片间距不少于24mm,距平板内缘不小于15mm。
332. 对所有产ESBLS的菌株应报告耐所有青霉素,头孢类及氨曲南。
333. 自泌尿道分离的肠杆菌药敏试验不报氯霉素的敏感性。
334. 利福平不能单独用于化疗。至今还未发现产B—内酰胺酶的肺链。至今未发现肺链对万古的抑菌圈小于17mm。
335. 定量评价抗菌药物杀菌效力的试验:主要是最低杀菌浓度(MBC)和杀菌曲线。抑菌浓度指数(FIC),<0.5协同作用,0.5—1相加作用,1—2无关作用,>2拮抗作用。
336.目前院内感染主要是G-杆菌。
寄生虫学
337. 宿主分类:终宿主、中间宿主、储存或保虫宿主、转续宿主。
338. 寄生虫对宿主:夺取营养、机械损伤、化学毒、变应原作用。
339. 寄生虫流行特点:地方性、季节性、自然疫源性。
340. 土源性蠕虫不用中间宿主,而生物源性寄生虫要。
341. 蛔虫感染期2—3个月,成虫在小肠以空肠多。
342. 鞭虫寄生于肓肠生活史约一个月,人是唯一传染源。
343. 蛲虫寄生于回肓部。
344. 钩虫的丝状蚴为感染期,成虫在小肠部可致大粪毒、黄肿病、桑叶黄。钩虫病患者常用异食症。
345. 丝虫的丝状蚴寄生于大淋巴管或淋巴结内可致流火、象皮肿、乳糜尿。
346. 吸虫除血吸虫外都是雌雄同体。
347. 旋毛虫:成虫和幼虫在同一宿主,不用在外发育,但要转换宿主,被寄生的宿主又是中间宿主。致病分:侵入期,幼虫移行期,囊包形成期。检验以活组织检查最可靠,免疫学检验是临床最常用的方法。
348. 吸虫除血吸虫(圆柱状,雌雄异体,虫卵致病最重)外都是两侧对称,
349. 华枝睾吸虫(肝吸虫)卵最小,姜片虫虫卵最大,
350. 肺吸虫第一中间宿主为川卷螺,第二中间宿主为淡水石蟹。囊蚴是其感染期,致病分:脓肿期,包囊期,纤维瘢痕期。
351. 人是猪带绦虫唯一终宿主,猪或人是中间宿主。
352. 人是牛带绦虫唯一终宿主,只被成虫寄生。
353. 痢疾阿米巴生活史:包囊—小滋养体---包囊。
354. 杜氏利什曼虫:感染称为黑热病,分人源型(平原型)、犬源型(山丘型)、野生动物型(荒漠型),主要的控制传染措施是防治白蛉。
355. 阴道滴虫有4根前鞭毛和1根后鞭毛。
356. 隐孢子虫以空肠上端感染最重,是艾滋病主要死因之一。
实验室管理
误差是测定值与真值的差。
精密度是每次测定值与算术平均值的符合程度。
系统误差决定正确度,可以校正和设法消除增加次数不能减少。
随机误差决定精密度,不能修正,但可增加次数来减小。
含有过失误差的值为异常值。
有效数字按照:四舍六入五单双的原则。
质控品到实验室后有效期一年以上。
实验方法的评价:
重复性试验:考察候选方法的随机误差。
回收试验:主要用于确定比例误差。
干拢试验:衡量候选方法的准确度形成恒定系统误差。
国际通用真空采血管颜色标志:红色:普通血清管,橘红色:快速血清管(内含促凝剂),金黄色:惰性分离胶促凝管,绿色:肝素抗凝管,浅绿色:血浆分离管(肝素锂),黑色:枸椽酸钠血沉管,浅兰色:枸椽酸钠血凝管,紫色:EDTA抗凝管,灰色:草酸钾/氟化钠抗凝管(测血糖时常用)
LIS:实验室信息系统。
止血带压迫最好不过1分钟。
常用流动相的极性大小是:水>甲醇>乙醇>丙醇>正丁醇>乙酸乙酯>氯仿>乙醚>甲苯>四氯化碳>环已烷>石油醚。
离子选择电极测定的是离子活度,而不是离子浓度。
脑脊液中蛋白质少,测定用考马斯亮兰染料结合法(线性差,手工多用),邻苯三酚红钼络合显色法(线性好,多用自动分析)。;
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