灵芝多糖的提取

灵芝多糖的提取

近年来，药理学和免疫学的多方研究表明，灵芝多糖芝扶正固本最有效的成分之一，具有广泛的药理活性，排毒、抗放射，提高肝脏、骨髓合成dna、bna的能力，抗肿瘤增强机体免疫等效果。因此多糖的提取为广大科研人员药研制者所重视，他们不断研究和探索灵芝多糖提取的方为弄清灵芝多糖的化学成分提供有力的理论依据，同时为许多疾病带来福音。

一、灵芝茵丝体多糖的提取

(一)材料

1．菌种：湖南省食用菌研究所提供的韩国灵芝母种。

2．种子培养基：玉米粉2％ 大米粉2％

蔗糖2％ 磷酸二氢钾o.1g

硫酸镁0.05％

ph值自然

3．发酵培养基：麦麸浸出液10％ 葡萄糖2％

硫酸铵0.2％

磷酸二氢钾0.2％ ph值自然

(二)方法

1．种子培养：

2．发酵培养生产菌丝体。

3．测定干、湿菌丝体。

将发酵液进行离心，然后取其沉淀物，加人60％蔗糖，进行高速(3000转／分)密度梯度离心5分钟，取上层菌丝体，洗净蔗糖再压干，即得湿菌体，然后再将湿菌体于高温下烘干即为干菌体。分别称取其重量。

4．多糖的提取。

(1)菌丝体预处理。取适量的灵芝湿菌体，用乙醇等有机溶剂进行处理，以除去湿菌体中的脂类物质，同时使糖苷酶失去活性，防止多糖的降解。

(2)用热水提取多糖。取上面经预处理的灵芝湿菌体，放人1：20的热水(95℃)中浸提，一次3小时，连续浸提3次，合并3次的水浸提液减压、浓缩至一定体积，再用3倍体积的95％乙醇混合，静置10－12小时，再离心，最后加入75％的乙醇反复洗涤，以沉淀多糖。此沉淀物为粗多糖，其中混杂有蛋白质、色素、低聚糖等小分子杂质，一般要经过纯化。

(3)多糖的纯化，去蛋白质和deae纤维素柱层析。去蛋白质一般采用sevag法：加入0.2倍多糖溶液体积的氯仿和0.04倍体积的正丁醇混合振荡半小时进行分离，直至氯仿与水的界面无沉淀为止，且要重复处理2-3次才能有效除去多糖中的蛋白质。多糖纯化一般采用硼酸型deae纤维素柱层析法：取脱蛋白后的多糖，分别以0.025mol／l、0.1mol/l的硼砂，0.1mol/l的氢氧化钠溶液进行洗脱，然后用0.2％恿铜硫酸液比色测定吸收度，收集有多糖的洗脱液，再浓缩脱盐即得所需的多糖。

(4)多糖纯度的鉴定。

可用电泳法进行鉴定，如果存在单一带，说明为纯多糖。

5．多糖与多糖中蛋白质含量的测定：

取一定量菌丝体粗多糖，加水煮沸溶解，用sevag方法脱去蛋白考马斯亮兰法测其粗多糖中蛋白质和多糖的含量。测得菌丝体中粗多糖含17.01％、多糖含5.43％、蛋白质含量2.16％。

二、灵芝子实体多糖的提取

(一)材料

1．菌种：韩国灵芝栽培种。

2．子实体栽培生产料：木屑78％，米糠20％，蔗糖1％，

石膏1％，ph值自然。

(二)方法

1．子实体栽培。

2．灵芝子实体预处理。

3．子实体多糖的提取。

取适量的灵芝子实体，捣碎成粉末，用80目筛过筛，然后用热水提取法进行提取。具体操作同菌丝体多糖的提取。提取出的粗多糖含有色素、蛋白质等小分子杂质，也须除去。

4．去除蛋白质和色素。

子实体粗多糖去除蛋白质也采用se阴法。去除色素，尚未发现很理想的方法。一般用乙醇进行反复冲洗，但效果不很理想。

5．多糖纯度的鉴定。

同菌丝体多糖纯度的鉴定。

6．子实体粗多糖、多糖及蛋白质含量的测定。

具体方法同菌丝体多糖及蛋白质含量的测定。测得子实体中粗多糖7.5％、多糖1.5％，蛋白质0.6％，其含量均低于菌丝体中的含量。可见菌丝体阶段就形成了灵芝多糖的有效成分，为灵芝液体深层发酵生产菌丝体提供了科学依据。

灵芝多糖的功效和作用

灵芝多糖是多孔菌科灵芝属真菌菌丝体的次生代谢产物，存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中。下面就由我为大家介绍下灵芝多糖的功效和作用，希望对大家有帮助。

灵芝多糖的功效和作用

1、免疫调节 经腹腔注射或经口服灵芝多糖，能增强对蛋白质抗原延迟超过敏化。灵芝多糖能增强伴刀豆球蛋白A诱导白鼠T细胞扩增。灵芝多糖能促进T淋巴细胞的转化而增强细胞免疫力;促进淋巴细胞的形成反应从而增强体液免疫力;增强淋巴细胞内DNA聚合酶的活性，促进细胞的增值、分裂，导致白细胞介素的合成和分泌，从而恢复因衰老而导致的免疫力下降。

2、抗肿瘤 灵芝多糖可以通过促进白细胞介素-2的生成，通过促进单核巨噬细胞的吞噬功能，通过提升人体的造血能力尤其是白细胞的指标水平，以及通过其中某些有效成分对癌细胞起到抑制作用，成为抗肿瘤以及癌症辅助治疗的优选药物。通过对小鼠S180的实验，发现灵芝多糖的抑瘤率达57.4%，而且剂量和抑瘤率之间呈线性关系。研究发现，灵芝多糖的抗肿瘤活性可能与其对宿主机能的影响有关，且水溶性多糖也可能起着更重要的作用，同时灵芝多糖有其合适的分子量范围，分子量越大，抗肿瘤活性越强。 安普胶囊含有人参叶提取物主要包括人参皂苷单体RH2、RG3;灵芝提取物主要包括灵芝多糖;红景天提取物主要包括红景天苷。安普胶囊中含有人参皂苷单体Rh2、人参皂苷单体Rg3、人参皂苷单体Rg5、人参皂苷单体Rh1、人参皂苷CK、苷元其总和大于35%。以上成分均有很强的抗癌活性，并在癌症不同的期间发挥作用。安普牌安普胶囊比纯单一成分的人参皂苷单体作用更好，更安全，更有效。以上成分可治疗各种癌症、预防各种癌症，效果显著。

3、抗衰老 灵芝多糖能促进血清、肝脏和骨髓的核酸及蛋白质的生物合成，因此可以有效地抗病毒;灵芝多糖可显著提高SOD活性，有效清除机体产生的自由基，从而阻止自由基对机体的损伤，防止机体的过氧化，保护了细胞组织，延缓了细胞衰老。灵芝多糖能显著促进细胞核内DNA合成能力，并可增加细胞的分裂代数。这些作用都能延缓机体的衰老，所以，灵芝多糖的抗衰老功能十分强大。

4、保护心脑血管 有研究表明，灵芝的多糖有明显的强心降压作用，对动脉粥样硬化有预防和治疗作用。将灵芝多糖经腹腔注射入正常小鼠，能降低血糖，其机理可能是由于提高了血浆胰岛素水平，加快了葡萄糖的代谢，外组织和肝的葡萄糖利用加快，而达到降血糖的作用。有研究证实，灵芝多糖可有效地扩张冠状动脉，增加冠脉血流量，改善心肌微循环，增强心肌氧和能量的供给，可明显降低血胆固醇、脂蛋白和甘油三酯，并能预防动脉粥样硬化半块的形成。并可改善局部微循环，抑制血小板凝聚(其机制尚不清楚)。

5、保肝解毒 灵芝多糖能促进肝脏对药物、毒物的代谢，可明显消除头晕、乏力、恶心、肝区不适等症状，并可有效地改善肝功能，使各项指标趋于正常。所以，灵芝多糖可用于治疗慢性肝中毒、各类慢性肝炎、肝硬化、肝功能障碍等。

6、其它的药用效果 对于中枢神经系统有较强的调节作用，具有镇静安神的功效，可改善睡眠。能延长和稳定其它降压药物的效果。镇咳、祛痰、平喘作用明显，缓解慢性支气管炎、支气管哮喘症状、可阻断过敏反应介质的释放，减轻过敏反应。保持和调节皮肤水分，恢复皮肤弹性，抑制皮肤中的黑色素的形成和沉淀。

灵芝怎么吃才更好的提取精华?

吃灵芝，首先要对灵芝有所了解，目前市场上的灵芝有野生灵芝和人工栽培灵芝，野生灵芝采摘的数量比较有限，野生灵芝无法收集孢子粉，而且有的野生灵芝有无毒性是无人去检测的。人工栽培的灵芝在食用性和安全性方面是有标准的，可控制的，而且也能收集到灵芝的精华——灵芝孢子粉。
灵芝的有效成分大致有灵芝多糖、灵芝酸（灵芝三萜类)、灵芝总碱、灵芝纤维、酯类、微量元素等许多对人体有着重要的生理功效。而这些成分主要是水溶性成分（如灵芝多糖等)和醇溶性成分（如灵芝酸等）。所以日常保健吃灵芝要么煲汤或泡茶，要么泡酒，这样两者不能兼顾，有效成分不能充分的利用。
我建议你吃灵芝应该服用灵芝子实体超细粉，因为这种粉的细度一般能达到280目，这样的细度在人体内能够被充分的吸收和消化。孢子粉则要经过破壁的。而用一般的粉碎机则不可能达到。现在市场上到处都有买的灵芝超细粉和孢子粉，价格不等，质量也参差不齐，应该请教懂的人问问。

真菌多糖类有哪些功效？

分类:医疗健康
解析:

多糖(Polysaccharide)是由单糖之间脱水形成糖苷键,并以糖苷键线性或分枝连接而成的链状聚合物。一般将多于20个糖基的糖链则称为多糖。近年来，糖类结构测定和生物活性研究取得了明显的进展，大量实验事实揭示糖类是重要信息分子，参与许多生理和病理过程，有关研究已渗诱到生物学各个领域[1]。研究表明,中药多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖等多种功能。

1 免疫调节功能

1.1对细胞免疫的影响

多糖可以增加T、B淋巴细胞的杀伤功能。张秀娟等[2]报道灵芝多糖对T细胞及其亚群有明显的影响,它可增加混合淋巴细胞培养中T细胞的回收量,在增加Lyt2+ 和L3T4+ 细胞回收量的同时,还可增强细胞毒T淋巴细胞(CTL)的杀伤功能。张伟云[3]等用铜绿假单胞菌分离纯化出胞外多糖（PEP）实验，得出PEP对小鼠胸腺淋巴细胞的增殖皆具有显著的促进作用，当浓度为6．25mg/L时即有非常显著的促进作用的结论。
可以增加树突状细胞（DC）细胞前体细胞的数量。DC细胞是目前发现的功能最强的抗原递呈细胞（APC），它能摄取各类抗原,在机体细胞免疫和体液免疫调控中均起着重要作用。何彦丽等[4]分析得出枸杞多糖、香菇多糖、云芝多糖等多种中药多糖（主要由β-1,3糖苷键为主链的葡聚糖或杂聚糖组成）可增加淋巴细胞培养上清液中的CSF(集落 *** 因子)活力，促进骨髓有核细胞数和粒 / 巨噬细胞集落数量的增加(CFU-GM)，而DC细胞与单核、粒细胞、T、NK等细胞有共同的祖细胞，有可能同时增加DC前体细胞数量。

可以提高巨噬细胞（MΦ）的活性。MΦ是具有多种功能的重要免疫细胞，可通过处理抗原和释放可溶性因子对免疫功能起重要的调节作用。关于多糖激活MΦ的机制，目前尚未完全清楚，但绝大多数中药多糖都能促进MΦ的吞噬功能。唐省三等[5]用猴头菇、香菇、茯苓3种真菌的多糖，配以葡萄籽多酚和甘草酸，制成复合多糖，研究对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响，得与荷瘤模型组和香菇多糖组比较，复合多糖各组可明显升高S180肉瘤小鼠腹腔巨噬细胞的活性，具有显著性差异。姚金凤[6]等的研究发现，海洋真菌多糖（YCP）可以明显促进小鼠腹腔巨噬细胞产生NO，并呈一定的浓度相关性。随药物浓度升高,其诱生作用增强，另外，YCP还可以明显促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1。

1.2 对体液免疫的影响

多糖可以促进抗体的生成。陈丽芳[7]等报道香菇多糖能增加人体中外周单核细胞抗体的产生，裂褶菌多糖能促进患者脾脏形成抗体的细胞增加。云芝多糖能使抗体下降的患者产生抗体，使其免疫能力恢复到正常水平。

多糖还可以恢复空斑形成细胞(PFC)的反应。倪峰[8]报道灵芝多糖（5mg/kg）腹腔注射3天可明显恢复降低的PFC反应。

1.3 对细胞因子的影响

多糖可以促进干扰素生成。干扰素是最先发现的细胞因子，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、控制细胞增殖等重要作用。倪峰[8]报道用平盖灵芝提取的多糖在体外可诱导Th细胞产生IFN，在体内增强ConA诱导T淋巴细胞增殖效应并产生IFN-α。

多糖还可以提高白细胞介素类（IL）的作用。倪峰[8]报道香菇多糖体内外均可增加腹腔MΦ产生IL-1，体内给药数小时后可见血清CSF和IL-1明显增加，且能提高免疫细胞对IL-2的敏感性。

1.4 对补体系统的影响

补体系统是机体重要的免疫系统。补体固有成分可被经典和旁路途径所激活。陈金烟等[9]报道香菇多糖也可以激活补体系统的经典途径和替代途径，导致MΦ的非特异细胞毒活性提高和嗜中性白细胞对肿瘤组织的浸润。茯苓多糖能激活肿瘤邻近的补体系统，协同吞噬细胞、淋巴细胞杀灭肿瘤细胞。

1.5 对红细胞免疫的影响

刘景田等[10]用灵芝、茯苓等进行试验研究发现中药多糖对红细胞免疫有促进和调节作用，作用机理是提高了红细胞膜相CD35免疫活性,进而促进红细胞与补体致敏酵母菌的粘附作用，从而使RBC.C3bRR（红细胞C3b受体花环率）增高，从而达到调节和增强其红细胞免疫功能的作用。

2. 抗肿瘤作用

2.1 抗肿瘤复发转移作用

中药多糖作为血管活性抑制剂发挥抗肿瘤复发转移作用。汪效英等[11]试验得出灵芝多糖能显著对抗血栓形成，减少血栓湿重，缩短血栓长度；显著延长部分凝血活酶时间，抑制血小板聚集，但对血小板数无影响。大剂量还有降低纤维蛋白原含量，缩短凝血酶和凝血活酶时间的作用。

2.2 对S180肉瘤的抑制作用

唐省三等[5]用猴头菇、香菇、茯苓3种真菌的多糖，配以葡萄籽多酚和甘草酸，制成复合多糖，研究复合真菌多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用，发现复合多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组荷瘤和香菇多糖组动物的瘤重、抑瘤率、瘤体比与荷瘤模型组相比均有明显的抑制作用。香菇多糖组亦有明显的抑制作用，但远不及复合多糖各组的作用效果。

2.3 对B16肿瘤的抑制作用

张伟云[3]等用铜绿假单胞菌分离纯化出胞外多糖（PEP）实验，发现PEP组对B16肿瘤细胞的生长皆有显著的抑制作用，并且随着浓度的增加，其抑制程度亦增加，当浓度为6．25mg/L时，差异有显著性；而当浓度为12．5mg/L时,其差异性有非常显著性。

2.4 对Lewis 肺癌的抑制作用

孙赛[12]等发现从海洋真菌中分离出的一种多糖YCP，可明显抑制Lewis肺癌的生长。

3. 降血糖作用

现己发现具有降血糖活性的真菌多糖有灵芝多糖、虫草多糖、云芝多糖、银耳多糖、毛木耳多糖、猴头多糖和木耳多糖。Hidino等[13]从灵芝子实体中分离得到两种具有降血糖活性的多糖Ganodetan A和 Ganodetan B，对正常小鼠及四氧嘧啶诱发的高血糖小鼠都有明显降糖活性。

4. 抗病毒作用

真菌多糖的抗病毒作用主要是利用其结构相似，通过免疫调节机制产生宿主免疫功能，以抗病原体的侵袭。许多研究证明，多糖对多种病毒，如艾滋病毒（HIV1）、单纯孢疹病毒（HSV1，HSV2）、巨细胞病毒（CMV）、流感病毒、囊状胃炎病毒（VSV）等有抑制作用[14]。另有研究表明，香菇多糖对泡状口炎病毒感染引起的小鼠脑炎有显著疗效和预防作用，对阿伯耳氏病毒和十二型腺病毒感染也有效。裂褶菌多糖可提高感染仙台病毒(sendai virus)小鼠的存活率，且有效抑制病毒的扩散。带有肽残基的云芝硫酸酯化多糖抗爱滋病病毒（HIV），作用效果与SO42-基的量成明显的比例关系。香菇多糖、灵芝多糖等对抗慢性肝炎也有显著疗效[15]。

5. 抗白血病作用

研究证明：杂色革盖菌多糖、猪苓多糖、茯苓多糖有抗白血病的作用[16]。

6. 抗氧化作用

已发现许多真菌多糖具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化的活性，起到保护生物膜和延缓衰老的作用。从长白山野生云芝(coriolus versicolar)中提取的彩云多糖(cvPs)，给予荷瘤或受γ射线全身照射的小鼠，能使多种脏器和细胞内soD活力升高、脂质过氧化物(LipidPeroxide，LPO)水平下降[17]。

7. 展望

真菌多糖具有十分广泛的药理学活性，可以把它作为一种新保健食品的发展方向，或是一种新药来源的开发研究方向。但是由于多糖的种类比较多，很难筛选出一种单体，对它的分离提纯造成了很大的难度。在多种药理学活性中还有很多作用机制并不清楚，而且在对其的毒理学特性、副作用方面的报道也并不多见。另外，真菌多糖作为一种植物药材的来源，它的采收加工对其的作用影响甚大，尤其现在，人们对它的高级结构还不了解，分离提纯技术还不到位的情况下，植物的来源、采加等对其发挥它独特的药理作用有着重大的影响。

参考文献：

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[4] 何彦丽，苏俊芳. 中药多糖抗肿瘤免疫药理研究的新思路——对树突状细胞的影响[J]. 中国中西医结合杂志，2003，23（1）：73-76.

[5] 唐省三，朱晓琴. 复合真菌多糖的抗肿瘤及免疫增强作用初探[J]. 基础医学与临床，2004，24（5）：599-600.

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[17]谭建权，魏文树，陈海生.彩云多糖药理研究进展[J]. 中成药，1999，21(5):259-260.

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