1 染色原理
Giemsa染色法 :吉姆萨染液由天青,伊红组成染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
PH对细胞染色有影响。细胞各成分均不蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中下在电荷增,易与伊红结合,染色偏红;在偏三性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色 偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用正经片必须清洁,无酸碱污染。配制顼特液必须用优质甲醇,稀释染色必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致各种细胞染色反应异常,以致识别困难,甚至造成错误。
2 介绍
MGG由May-Grunwald染料和Giemsa染料组成。前者化学名为曙红亚甲基蓝Ⅱ,对胞质着色较好;后者对胞核着色较好。因此MGG染色,可兼两者的优点,常用于细胞涂片染色。
2.1 1.染液配制
I液的配制:
迈格染料 lg
甲醇 100ml
在研钵内用少量纯甲醇将染料充分研磨成均匀一致的悬液,倒人烧瓶中,加入其余的甲醇后置入37℃温箱4-6小时,每隔半小时研磨半小时,然后放入深棕色瓶内,在室温下保存,2周后使用。临用前取上液40ml,加纯甲醇20ml混合用作工作液。
Ⅱ液的配制:
姬氏染粉 0.6g
甘油 50ml
甲醇100ml
将姬氏染粉溶于甘油内,在研钵内研磨3-4小时,使之磨匀,加入纯甲醇后搅拌均匀,放入深棕色瓶内,室温下保存,2周后即可使用。
磷酸缓冲液配制:1%磷酸氢二钠20ml,l%磷酸二氢钠30ml,加蒸馏水至1000ml,调整pH 6.4-6.8(用蒸馏水代替缓冲液,效果亦佳)。
2.2 2.染色步骤
(1)自然干燥的细胞涂片(预先滴加甲醇固定更好)水平置于染色架上。
(2)将I液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)滴盖涂片上,lO-30分钟。
(3)倒弃涂片上的I液,自来水漂洗干净。
(4)立即滴盖Ⅱ液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)在涂片上染色10-30分钟。
(5)倒弃涂片上的Ⅱ液,自来水漂洗干净。
(6)趁湿加盖片或待干后镜检。
2.3 3.染色结果
MGG染色将细胞核染成紫红色,细胞质和核仁染成蓝紫色。
2.4 4.MGG染色特点
染色方法简单,且兼有瑞氏、姬氏两种染色的优点,并且涂片可保存十多年而不退色。MGG染色对胞质胞核染色效果均较好,结构清晰,所染细胞亦比HE染色的细胞大;同时对细菌、霉菌及胆固醇结晶的显示也很清楚。因此适用于淋巴造血系统的细胞标本、胸腹水、穿刺标本等。尤其对鉴别恶性淋巴瘤的类型,MGG染色更有帮助。
你好,你问的是Giemsa染色和Hoechst染色对比,优缺点是什么吗?Giemsa染色和Hoechst染色对比,Giemsa氏染色的染色过程比Hoechst染色更易控制、不污染,是其最大的优点;Giemsa染色的染色时间比Hoechst染色长,是其缺点。Giemsa染色法染液由May-Grunwald染料和Giemsa染料组成。前者化学名为曙红亚甲基蓝Ⅱ,对胞质着色较好;后者对胞核着色较好。Hoechst染色是荧光染色中的一种类型,专门用来在荧光显微观察下标示DNA。由于可将DNA标示,此种染色方式也可以用来辨识内含DNA的细胞核及线粒体的位置。
别名:姬姆萨染色液,吉姆萨染色液,姬姆萨染原液。 吉姆萨染液为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物,本染色液最适于血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色。染前用蛋白酶等进行处理,然后再用姬姆萨染液染色,在染色体上,可以出现不同浓淡的横纹样着色。姬姆萨染液可将细胞核染成紫红色或蓝紫色,胞浆染成粉红色,在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
吉姆萨染色带即染色体带型。是根据细胞学的特殊处理程序,使染色体显现出深浅不同的染色带。染色带的数目、部位、宽窄和着色深浅均具有相对稳定性,所以每一条染色体都有固定的分带模式,即称带型。染色体带型是鉴别染色体的重要依据。通过分带机理的研究,可获得染色体在成分、结构、行为和功能等方面的许多信息。
染色方法的基础是组织结构对不同染料的结合程度不同。染料苏木精可以将嗜碱性结构染成蓝紫色,而伊红可以将嗜酸性结构染成粉红色。
嗜碱性结构通常包括含有核酸的部分,如核糖体、细胞核及细胞质中富含核糖核酸(RNA)的区域等。
嗜酸性结构则通常由细胞内及细胞间的蛋白质,如路易体(Lewy body)、酒精小体(Mallory body)、细胞质的大部分等。
G带即吉姆萨带,是将处于分裂中期的细胞经胰酶或碱、热、尿素等处理后,再经吉姆萨染料染色后所呈现的区带。
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